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yangxicshe

铁虫 (小有名气)

[求助] 液相出峰时候随着时间往后移?怎么解决??

用HPLC-ECD分析样品出现分裂峰
流动相0.1M柠檬酸,0.1M乙酸钠,100uM EDTA, 0.01%SOS (5%甲醇)
1.出峰时候还是随着时间往后移(例如第一针4分出峰,第二针4.5分出峰,第三针4.8分出峰)
2.峰有拖尾现象
3.有分裂峰(重新培养品,还是有分裂峰),检查了柱子,很干净

本人菜鸟不会再帖子中传图片,只能上传附件了,请各位大侠指点

图是相同样品同一浓度的两次图(图一没有加5%甲醇,图二加了5%甲醇)
(pump: waters 1525
   ECD: water 2465
   column: ODS)



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专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

yangxicshe(金币+1): 非常感谢!、 2011-06-16 13:45:56
峰分裂可能是样品浓度太大。
你做的流动相里有离子对试剂EDTA,柱子需要的平衡时间较长。柱没平衡,故出峰不正常。
水滴石穿!!
2楼2011-06-16 12:00:58
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yangxicshe

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by News at 2011-06-16 12:00:58:
峰分裂可能是样品浓度太大。
你做的流动相里有离子对试剂EDTA,柱子需要的平衡时间较长。柱没平衡,故出峰不正常。

样品浓度太大时什么意思?还是进样量太大了?浓度过大的话,不是应该出一道水平的线吗?
另外我查资料,工作电压400mV以上,EDTA会影响出峰,我们用的电压是800mV,会不会有影响
3楼2011-06-16 13:46:03
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News

专家顾问 (职业作家)


opq691(金币+1): O(∩_∩)O谢谢 2011-06-16 21:05:54
引用回帖:
Originally posted by yangxicshe at 2011-06-16 13:46:03:
样品浓度太大时什么意思?还是进样量太大了?浓度过大的话,不是应该出一道水平的线吗?
另外我查资料,工作电压400mV以上,EDTA会影响出峰,我们用的电压是800mV,会不会有影响

我的意思是:你的进样量太大,柱过载了。
相关液相的书籍以及有经验人士的总结,流动相里含EDTA的柱子需要很长时间来平衡
水滴石穿!!
4楼2011-06-16 18:07:20
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kandengren

金虫 (小有名气)

青虫

我也认为是进样量太大了,加大分流比试试
5楼2011-06-16 18:12:14
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zgf340631735

至尊木虫 (文坛精英)


opq691(金币+1): O(∩_∩)O谢谢 2011-06-16 21:06:06
柱子没有平衡好。多平衡一会儿
学无止境
6楼2011-06-16 19:00:59
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only爱弥儿

新虫 (初入文坛)

你换一根不同品牌的柱子试试看呢。我之前也遇到类似的情况。平衡时间久一点。
7楼2011-06-19 14:48:45
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