应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » Talon Co2+纯化树脂对His-tagged重组蛋白进行纯化
51/1返回列表
查看: 2586  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

13815182786

新虫 (初入文坛)

[求助] Talon Co2+纯化树脂对His-tagged重组蛋白进行纯化 已有2人参与

我用Talon Co2+纯化树脂对His-tagged重组蛋白进行纯化，说明书上用最高15omM 的咪唑进行洗脱，但是结果纯化下来的蛋白量很少，我又用200mM,250mM的洗脱，又洗下来差不多的量，浓度高的咪唑对它会有什么影响吗，我要测定酶活应该选哪个呢，求助！

Talon Co2+纯化树脂对His-tagged重组蛋白进行纯化
20141223151437294.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-12-23 15:17:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

13815182786

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lihe131 at 2014-12-23 15:46:20
最好把洗脱的蛋白透析一下，或者用脱盐柱换一下buffer，否则对酶活可能会不太好。
祝顺利！

谢谢，我会试试的
回复此楼
4楼2014-12-25 14:03:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

lihe131

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
13815182786(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-12-23 19:12:00
最好把洗脱的蛋白透析一下，或者用脱盐柱换一下buffer，否则对酶活可能会不太好。
祝顺利！
赞一下 回复此楼
2楼2014-12-23 15:46:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
13815182786(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-12-26 20:32:51
钴柱比镍柱用的咪唑浓度低. 150mM咪唑一般就够用了，你可以加大洗脱用的体积。
大部分情况下咪唑浓度稍微高些在短时间内对于蛋白活性没有太大影响，只要你洗脱完了以后用透析或者离子交换柱换一下缓冲液
赞一下 回复此楼
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
3楼2014-12-24 02:59:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

13815182786

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by fuyuandj86 at 2014-12-24 02:59:21
钴柱比镍柱用的咪唑浓度低. 150mM咪唑一般就够用了，你可以加大洗脱用的体积。
大部分情况下咪唑浓度稍微高些在短时间内对于蛋白活性没有太大影响，只要你洗脱完了以后用透析或者离子交换柱换一下缓冲液

好的，谢谢，顺便问一下，钴柱怎么回收呢，我看说明书上用pH5.0 20mM MES 洗，然后保存在20%乙醇里，这是什么原理，之后怎么回收再利用呢？
赞一下 回复此楼
5楼2014-12-25 14:08:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[硕博家园] 读博的好处 +3 lnee 2026-08-11 3/150 2026-08-11 18:10 by 希望我好好的
[基金申请] 什么时候出结果，有咨询渠道？？？ +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +3 布布和一二 2026-08-11 4/200 2026-08-11 15:20 by aasahr
[论文投稿] 职称评审，求友友推荐见刊最快的期刊 +3 工厂打螺丝 2026-08-08 3/150 2026-08-11 13:42 by 会议编辑
[基金申请] 听说今天filecode变了 +26 布布和一二 2026-08-06 49/2450 2026-08-11 13:18 by WH3796
[基金申请] filecode +9 documentary 2026-08-10 9/450 2026-08-11 10:08 by wk7465
[基金申请] 我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人 +8 家与远方 2026-08-10 13/650 2026-08-11 09:49 by 家与远方
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +3 majunge000 2026-08-10 3/150 2026-08-10 15:46 by lch2012
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] fileCode有新解读？ +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode，很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制，评价高的钱多评价低的钱少，但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 固定端突然变了，今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] 大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭