| 查看: 3074 | 回复: 2 | ||
tianqingzn新虫 (初入文坛)
|
[求助]
镍柱纯化蛋白遇到了些问题，蛋白挂不上柱，怎么办？？？？求解 已有1人参与
|
| 大肠杆菌重组表达的蛋白，带有his标签（N端和C端各一个），经过超声波破碎取上清，酶活很高，然后用镍柱纯化粗酶液，开始用的结合缓冲液加有咪唑，最后的结果是蛋白没挂柱，因为第一次收的液体酶活很高，最后用洗脱液收的液体没有酶活。后来用不加咪唑的结合缓冲液重新纯化蛋白，结果是挂上少许蛋白，而且最终收的液体测酶活酶活很低，该怎么优化纯化体系？？？？还是因为蛋白的his标签在蛋白里面包裹没有暴漏出来，所以挂不上柱，求解，拜托给位前辈了！！！！ |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有168人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 蛋白挂不上Q阴离子柱
已经有7人回复
- 组氨酸结合镍柱问题
已经有16人回复
- 包涵体上镍离子柱纯化后，洗脱收集的液体中目的蛋白不见了
已经有10人回复
- GST包涵体蛋白复性后挂不上柱子，急急急~~
已经有7人回复
- 镍柱纯化His标签蛋白，洗脱不下来
已经有11人回复
- 请教，镍柱纯化蛋白后，镍柱上的咪唑用除去吗？
已经有6人回复
- 蛋白质纯化总是挂不上柱子，全洗脱下来了，请大家帮忙一下哦
已经有9人回复
- 蛋白过镍柱纯化，在用咪唑洗脱后需要做透析，透析怎么做？？？
已经有15人回复
- 蛋白纯化Ni-IDA柱子出现问题
已经有20人回复
- 带HIS-tag标签蛋白过NI-NDA挂不上柱子
已经有5人回复
- 关于镍柱纯化，急求，！！
已经有12人回复
- 镍柱纯化中再生后柱子变白，什么问题？
已经有22人回复
- 蛋白质的Ni柱纯化问题
已经有23人回复
- His标签的蛋白纯化柱子
已经有10人回复
- 今天你纯化蛋白了吗？跪求柱子挂不好的原因。。。。
已经有15人回复
- 关于变性条件下his-tag重组融合蛋白不结合镍柱以及部分结合镍柱情况
已经有17人回复
- 镍柱纯化蛋白透析出现大量沉淀，请教
已经有18人回复
- 疏水柱为何挂不上蛋白，求解！
已经有9人回复
- 【求助/交流】为什么镍柱纯化可溶性蛋白，电泳结果总是显示不纯呢？
已经有9人回复
- 基因带六个his标签，蛋白纯化时为何挂不上镍柱
已经有26人回复
lpzl
木虫 (正式写手)
- 应助: 59 (初中生)
- 金币: 4125.1
- 红花: 2
- 帖子: 306
- 在线: 526.2小时
- 虫号: 2412684
- 注册: 2013-04-11
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
2楼2014-12-18 16:39:07
3楼2014-12-21 00:53:47
