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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 蛋白挂不上Q阴离子柱
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1020490511

银虫 (小有名气)

[求助] 蛋白挂不上Q阴离子柱已有3人参与

本人在做蛋白纯化，目的蛋白大约为5.使用阴离子交换柱做蛋白纯化，A液:Tris-HCl，ph8.0.B液Tris-HCl-0.5M NaCl，ph7.0.过Q阴离子柱后目的蛋白几乎全在穿透峰里，没挂在柱子上，求解~怎样才能挂在柱子上，并且洗脱效果较好~
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1楼2014-08-29 19:11:43
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kos900907

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是不是你的平衡液里面得加些盐离子。感觉平衡液电导不够哈，
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生物制药
2楼2014-09-01 09:19:31
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1020490511

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by kos900907 at 2014-09-01 09:19:31
是不是你的平衡液里面得加些盐离子。感觉平衡液电导不够哈，

看说明书，A液不需要加盐的呀，盐离子本来就是洗脱的条件，有盐离子不就更挂不上嘛？A液电导在0.67附近。

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3楼2014-09-01 10:44:55
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kos900907

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 1020490511 at 2014-09-01 10:44:55
看说明书，A液不需要加盐的呀，盐离子本来就是洗脱的条件，有盐离子不就更挂不上嘛？A液电导在0.67附近。
...

那你的上样液的ph有没有调到8.0左右啊。
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生物制药
4楼2014-09-01 10:48:07
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1020490511

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by kos900907 at 2014-09-01 10:48:07
那你的上样液的ph有没有调到8.0左右啊。...

已经做A液透析了。

[ 发自小木虫客户端 ]
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5楼2014-09-01 14:28:19
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kos900907

木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 1020490511 at 2014-09-01 14:28:19
已经做A液透析了。
...

哦哦。
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生物制药
6楼2014-09-01 14:53:55
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silkwizard

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

个人觉得最好还是在A液里面加上低浓度的盐，理论上是可以不加，但是适当的盐浓度有助于蛋白质的稳定。
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寂寞,是一种自由,让眼睛看着背影远走...
7楼2014-09-02 16:50:04
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bishopsleeve

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

请问楼主问题解决了吗？我也出现了这样的情况，不知道该怎么办
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8楼2014-11-17 15:32:47
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