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1020490511

银虫 (小有名气)

[求助] 蛋白挂不上Q阴离子柱 已有3人参与

本人在做蛋白纯化,目的蛋白大约为5.使用阴离子交换柱做蛋白纯化,A液:Tris-HCl,ph8.0.B液Tris-HCl-0.5M NaCl,ph7.0.过Q阴离子柱后目的蛋白几乎全在穿透峰里,没挂在柱子上,求解~怎样才能挂在柱子上,并且洗脱效果较好~
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silkwizard

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

个人觉得最好还是在A液里面加上低浓度的盐,理论上是可以不加,但是适当的盐浓度有助于蛋白质的稳定。
寂寞,是一种自由,让眼睛看着背影远走...
7楼2014-09-02 16:50:04
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查看全部 8 个回答

kos900907

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
是不是你的平衡液里面得加些盐离子。感觉平衡液电导不够哈,
生物制药
2楼2014-09-01 09:19:31
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1020490511

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by kos900907 at 2014-09-01 09:19:31
是不是你的平衡液里面得加些盐离子。感觉平衡液电导不够哈,

看说明书,A液不需要加盐的呀,盐离子本来就是洗脱的条件,有盐离子不就更挂不上嘛?A液电导在0.67附近。

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2014-09-01 10:44:55
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kos900907

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 1020490511 at 2014-09-01 10:44:55
看说明书,A液不需要加盐的呀,盐离子本来就是洗脱的条件,有盐离子不就更挂不上嘛?A液电导在0.67附近。
...

那你的上样液的ph有没有调到8.0左右啊。
生物制药
4楼2014-09-01 10:48:07
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