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荧光定量PCR扩增效率很低 已有11人参与
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| 荧光定量PCR,什么参数都合格就是扩增效率很低,换了好多条件都很低,请问是怎么回事呀?引物我都加的1ul,cDNA加了1ul或者2ul,都试过,另外三步法也都试过,扩增效率都上不去,做了好多次都是,都快崩溃了。还有就是我的引物长度大概200多bp,有的接近300,一般都超过250了,这影响大吗?可是我都用三步法延伸了呀?求各位高手赐教呀! |
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