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SDS-PAGE出了问题,我是新手,求助!!!
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孤の魔灵
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[
求助
]
SDS-PAGE出了问题,我是新手,求助!!!
我的SDS-PAGE电泳以前一直用的是浓度为12%的分离胶,但是不知怎么,突然marker整体下移,跑出9%浓度的效果,现在用的是13.5%的浓度的分离胶,虽然可以用,但是还是没有以前12%的分离胶效果好,已经试过好多办法,各种试剂都换了一遍,都没用,试剂也没过期,求各位大神帮帮忙咯!!!!
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1楼
2014-12-02 21:04:48
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孤の魔灵
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5楼
:
Originally posted by
aza加油nn
at 2014-12-23 20:04:44
是否观察过温度,温度过高会使胶孔径变大从而使跑胶比平时温度下快一点,且条带会下移!温度过低会使胶孔径变小,跑胶较慢!
一直都是在20℃的条件下跑胶,就是冬天也是在空调房里,制胶,跑胶,也没出什么问题,结果有一天突然就这养了,毫无头绪
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7楼
2015-02-03 11:40:53
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乖乖。。。得看到什么时候
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2014-12-03 19:01:06
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秋雨晗晨
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【答案】应助回帖
我一直用12%的胶,感觉挺好的呃,你所说的Mark整体下移,是连内参都跟mark对应不上吗,比如tubulin、actin和GAPDH,你用着几个内参看看是不是mark错位降解了,还有一种可能,就是胶没有夹紧,缓冲液一直在漏,这种情况也会导致跑的不齐,最好是有图
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3楼
2014-12-15 12:28:42
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嘿小杨同志
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【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
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★
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2015-05-16 10:07:22
换成低电压100v这样 跑时间长点,跑胶的时候可以放在冰盒上,避免温度过高。 还有marker是线性的,楼主处理样品的时候要加sds和2-ME,有些时候是蛋白样品没有处理好。
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4楼
2014-12-18 21:37:58
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