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msms

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[求助] 新手求助，有没有前辈能帮忙看一下我的SDS-PAGE胶，跑了一个多月一直这样

条带清晰的是四月份跑的胶，后面模糊的是最近一个月跑的，样品都是一样的，水稻籽粒全蛋白，不知道为什么最近跑不出来，图片在附件，我不知道怎么直接贴上来，请各位前辈帮忙看看。

1.jpg

新手求助，有没有前辈能帮忙看一下我的SDS-PAGE胶，跑了一个多月一直这样-1

2.jpg

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1楼 2013-07-29 09:27:47

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用的12%的浓度，还有我跟缓冲液煮过的样品跑出来也不清晰，反而没煮过的样品条带很清晰，请问这是怎么回事？

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2楼2013-07-29 09:30:29

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cicelyzh

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【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, good 2013-07-30 00:02:42

煮不煮在于蛋白的变性不同。可溶蛋白煮一下会比较好，膜蛋白煮过反而容易发生聚集，一般是不煮比较好。如果跑全蛋白，你需要根据自己的需要如何变性。条带不清晰还有可能是配胶缓冲液的pH变化了。

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3楼2013-07-29 23:45:57

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引用回帖:

3楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-07-29 23:45:57
煮不煮在于蛋白的变性不同。可溶蛋白煮一下会比较好，膜蛋白煮过反而容易发生聚集，一般是不煮比较好。如果跑全蛋白，你需要根据自己的需要如何变性。条带不清晰还有可能是配胶缓冲液的pH变化了。

缓冲液是新配的，而且同一块胶上面的条带清晰，越往下越模糊是怎么回事？

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4楼2013-07-30 09:06:21

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