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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » sds-page跑胶时间太长，时间也有问题
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cxch1224

新虫 (小有名气)

[求助] sds-page跑胶时间太长，时间也有问题

sds-page的图跑成了这个样子，跑的芽孢杆菌总蛋白，请问要怎么调整胶浓度？跑胶时间？电泳上下槽的电泳液要不一样吗？第一次做，很多不懂，望解答，感激不尽


[ Last edited by cxch1224 on 2012-3-26 at 09:37 ]
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1楼 2012-03-26 09:27:57
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回帖置顶 ( 共有1个 )

telomerase

至尊木虫 (著名写手)

cain

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
小丹木木: 金币+2, 挺热心哈 2012-03-27 11:23:46
西瓜: 金币+3, MolEPI+1, 很有经验！ 2012-03-28 10:20:56
不知道你要做什么，目的蛋白在哪里，看图嘛下面这些是的话，还可以再跑跑，拉开距离。可以跑浓度高一点的，因为你这些跑的蛋白看来有点小

就说你的题目问的，长时间跑胶会热，会影响结果
建议加个maker，最右边的那个是吗？
      跑胶每孔的体积要一制，不够补上样缓冲液，要不你看你的第4道，被挤成啥养了。
    尽量选中间的道跑，边上会斜，想你的胶左边那样。在中间跑时两边的空孔最好也加上样缓冲液，把它挤着，那样好看
   调调上样量，3,5的有点多，2,4的有点少
   跑的稍有点弯，还可以，最好不变电压跑完，80v（我常用，仅供参考）

电泳上下槽的电泳液 是一样的，一般上槽我会用新的，下槽用旧的。 不缺钱，就全新的
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cxch1224
我的路靠我的脚踩出来！！！不走寻常路！！！
2楼2012-03-26 16:54:31
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普通回帖

telomerase

至尊木虫 (著名写手)

cain
不行，蛋白定个量，统一下
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我的路靠我的脚踩出来！！！不走寻常路！！！
3楼2012-03-26 16:56:11
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若然飞翔

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
cxch1224: 金币+1, ★有帮助, 谢谢 2012-03-27 19:01:16
二楼说的很有道理，还有一个是你的胶浓度，我们8K左右的蛋白用15%的胶，250K左右的用6%的胶，30K左右的用12.5%胶，都有不错的结果
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4楼2012-03-27 08:17:56
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cxch1224

新虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by telomerase at 2012-03-26 16:54:31:
不知道你要做什么，目的蛋白在哪里，看图嘛下面这些是的话，还可以再跑跑，拉开距离。可以跑浓度高一点的，因为你这些跑的蛋白看来有点小

就说你的题目问的，长时间跑胶会热，会影响结果
建议加个maker，最右 ...

非常感谢
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5楼2012-03-27 19:01:59
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cxch1224

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by telomerase at 2012-03-26 16:54:31:
不知道你要做什么，目的蛋白在哪里，看图嘛下面这些是的话，还可以再跑跑，拉开距离。可以跑浓度高一点的，因为你这些跑的蛋白看来有点小

就说你的题目问的，长时间跑胶会热，会影响结果
建议加个maker，最右 ...

染料前沿是蓝色的吗？怎么我看到蓝色的染料前面还有一条乳白色或者土红色的线？
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6楼2012-03-27 19:13:05
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telomerase

至尊木虫 (著名写手)

cain
★ ★
西瓜: 金币+2, 鼓励交流 2012-03-28 10:21:11
应该是蓝色的那条线，我当时做大点的蛋白，都要把最前面的跑出去
你这个蛋白有点小感觉，跑到浓点的胶到底下1/3或1/4处，应该就差不多了
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我的路靠我的脚踩出来！！！不走寻常路！！！
7楼2012-03-27 19:56:39
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大嘴猴巴拉

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by telomerase at 2012-03-26 16:54:31
不知道你要做什么，目的蛋白在哪里，看图嘛下面这些是的话，还可以再跑跑，拉开距离。可以跑浓度高一点的，因为你这些跑的蛋白看来有点小

就说你的题目问的，长时间跑胶会热，会影响结果
建议加个maker，最右边 ...

请问你是一直用80V跑完？那要跑多久呀
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8楼2016-08-31 10:37:25
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