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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求教有关SDS-PAGE凝胶的问题
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饼哥

木虫 (正式写手)

[求助] 求教有关SDS-PAGE凝胶的问题

虫友们，我最近在跑SDS-PAGE，这几次发现制完分离胶后用水封,胶凝后,胶面不是一个直线,而是略向上鼓起。以前不是这样的，都是一条直线，这是咋回事啊？
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爱科研，更爱小木虫！
1楼 2011-09-12 15:44:23
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wanhscn

木虫 (职业作家)

哲学@草根
★ ★
西瓜(金币+2): good 2011-09-12 23:41:48
水封也行,要缓慢均匀加入
用异丁醇封不错!
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真相是最大的奢侈品
2楼2011-09-12 19:24:19
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饼哥

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wanhscn at 2011-09-12 19:24:19:
水封也行,要缓慢均匀加入
用异丁醇封不错!

仔细想想，我这几次水封确实加得有点急，明天我再试一次，要是还不行，就用你说的方法看看。
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爱科研，更爱小木虫！
3楼2011-09-12 22:45:23
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chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
dhd997(金币+3): good 2011-09-13 07:45:43
用无水乙醇缓慢封之。
因为凝胶较慢，因此，如果不放心，封完后轻轻摇动使之均匀压平。
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4楼2011-09-13 07:37:49
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饼哥

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by chenguestc at 2011-09-13 07:37:49:
用无水乙醇缓慢封之。
因为凝胶较慢，因此，如果不放心，封完后轻轻摇动使之均匀压平。

今天又试了一次，加水时动作已经很轻柔了，还是不行，凝后中间凸两边凹。但情况比以前有所改观。我想问一下，用无水乙醇封，胶凝后倾去乙醇，是否要用去离子水淋洗？
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爱科研，更爱小木虫！
5楼2011-09-13 11:28:36
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chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
西瓜(金币+2): good 2011-09-13 11:52:26
饼哥(金币+5): 谢谢耐心解答，我晚上再做一次。 2011-09-13 11:54:30
引用回帖:
5楼: Originally posted by 饼哥 at 2011-09-13 11:28:36:
今天又试了一次，加水时动作已经很轻柔了，还是不行，凝后中间凸两边凹。但情况比以前有所改观。我想问一下，用无水乙醇封，胶凝后倾去乙醇，是否要用去离子水淋洗？

可用水清洗几次，也可放置一会自然挥发，无水的还是挥发的挺快的。
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6楼2011-09-13 11:41:42
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子曰包子好吃

银虫 (小有名气)
我们这里使用异丙醇封，效果很好的，一般1.5mm的板用200ul异丙醇就行了
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7楼2011-09-13 12:03:39
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hjyxm

木虫 (正式写手)
换一块板子试一试呢？
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好好工作！
8楼2011-09-13 12:05:28
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xkw5526

铜虫 (初入文坛)
中间部分多加一些水，之后震一震
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9楼2011-09-13 13:00:52
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hellolin

金虫 (小有名气)
是不是那块板是漏的~~从两边漏走了一些
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scienceguy
10楼2011-09-13 14:01:09
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