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@木笔@木虫 (小有名气)
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[求助]
为何SDS-PAGE胶Marker很清晰，而其他带颜色均较浅？ 已有2人参与
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| 请问，各位，我的SDS-PAGE胶这两天跑的时候Marker很清晰，而其他带颜色均较浅，以至于都没有办法分清楚目的蛋白的条带了，请问各位有好的建议么？多谢了 |
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d00614028
银虫 (小有名气)
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
silicare: 金币+5, BioEPI+1, 谢谢参与 2014-04-01 16:35:01
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silicare: 金币+5, BioEPI+1, 谢谢参与 2014-04-01 16:35:01
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不知道你是直接染胶还是做western，如果是直接染胶的话可能是蛋白上样量太低，多上点试试 如果是做western的话，出现这种情况有以下几种原因： 1. 蛋白上样量不够，导致一抗二抗结合的少。 2. 一抗特异性不强，结合不了目的蛋白，你所看到的带都是杂带。我曾经出现过这种情况，针对一种蛋白有很多公司都有相应的抗体，这些抗体的特异性不一样，我有次试HA-tag的抗体试了4个公司的，最后才找到一个非常好的抗体，最后就一直沿用。可以换抗体试试。 3. 你的抗体稀释倍数过高，导致没有结合。或者封闭时间太长。 |
2楼2014-03-28 22:38:46
@木笔@
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3楼2014-03-29 20:58:07
jiangxincsu
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4楼2014-04-01 13:45:00
@木笔@
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5楼2014-04-01 14:15:26
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