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rsgd1990

银虫 (初入文坛)

[求助] 关于SDS-PAGE的一个问题

自己本科生刚进实验室,老师让跑PAGE ,结果配下层胶时没有凝固或者凝固的很慢,试剂肯定没问题,因为和我一起做的另一个同学的都凝了,而且我的下层胶也不平整,请高手指点一下是哪里操作的问题?
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nach

铜虫 (著名写手)

不让吃就去死

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★ ★ ★ ★
wanhscn(金币+4): Very Good! 2011-10-01 09:31:08
rsgd1990(金币+1): 试剂没问题,因为另一个人的就凝了,不过还是谢谢。是不是没有混匀的原因啊 2011-10-02 00:57:01
TEMED 加少了  或者APS不新鲜(这点很重要)
不让吃就去死
2楼2011-10-01 05:04:51
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nach

铜虫 (著名写手)

不让吃就去死

【答案】应助回帖


西瓜(金币+1): 欢迎交流。这种情况,混匀了就好吧。 2011-10-04 11:09:04
也有可能是这两样东西加多了导致局部凝固过于迅速 而大多数无法凝固
不让吃就去死
3楼2011-10-01 05:07:07
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小白虾

木虫 (小有名气)

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西瓜(金币+1): 欢迎交流 2011-10-04 00:35:20
应该是TEMED加少啦,或者是过硫酸铵量少,再者原因就是PH值不对
飞的更高
4楼2011-10-01 11:12:03
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5楼2011-10-01 15:47:33
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分子菜鸟

木虫 (小有名气)

★ ★
wanhscn(金币+2): 鼓励交流 2011-10-02 14:15:23
胶不平整可能是没混匀。不知你加TEMED和APS是用什么加的,要是用的微量进样器仔细看看是不是吸上来了气泡而没把药品吸上来,尤其是瓶子里药品少的时候容易吸不上来。
6楼2011-10-02 09:53:54
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zxq0623

新虫 (小有名气)

★ ★ ★
西瓜(金币+3): Good!一般都是要拿水或者其他试剂压下的。我们倒胶是那1ml的枪加的,不是很墨迹的话都没问题呢。 2011-10-04 00:37:19
加的过硫酸铵可能少了。不平整可以上面加上一层蒸馏水或正丁醇。在一个就是倒胶的时候要连续,最好用引流条。
7楼2011-10-02 16:48:04
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zxq0623

新虫 (小有名气)


西瓜(金币+1): 鼓励交流。第一次听说,学习了! 2011-10-04 11:09:29
如果还不行的话,配好胶以后可以放在真空泵里抽一下,这样胶凝的好,速度也快。
8楼2011-10-04 10:11:37
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