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cxch1224

新虫 (小有名气)

[求助] sds-page跑胶时间太长,时间也有问题

sds-page的图跑成了这个样子,跑的芽孢杆菌总蛋白,请问要怎么调整胶浓度?跑胶时间?电泳上下槽的电泳液要不一样吗?第一次做,很多不懂,望解答,感激不尽


[ Last edited by cxch1224 on 2012-3-26 at 09:37 ]
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telomerase

至尊木虫 (著名写手)

cain

★ ★
西瓜: 金币+2, 鼓励交流 2012-03-28 10:21:11
应该是蓝色的那条线,我当时做大点的蛋白,都要把最前面的跑出去
你这个蛋白有点小感觉,跑到浓点的胶到底下1/3或1/4处,应该就差不多了
我的路靠我的脚踩出来!!!不走寻常路!!!
7楼2012-03-27 19:56:39
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telomerase

至尊木虫 (著名写手)

cain

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
小丹木木: 金币+2, 挺热心哈 2012-03-27 11:23:46
西瓜: 金币+3, MolEPI+1, 很有经验! 2012-03-28 10:20:56
不知道你要做什么,目的蛋白在哪里,看图嘛下面这些是的话,还可以再跑跑,拉开距离。可以跑浓度高一点的,因为你这些跑的蛋白看来有点小

就说你的题目问的,长时间跑胶会热,会影响结果
建议加个maker,最右边的那个是吗?
      跑胶每孔的体积要一制,不够补上样缓冲液,要不你看你的第4道,被挤成啥养了。
    尽量选中间的道跑,边上会斜,想你的胶左边那样。在中间跑时两边的空孔最好也加上样缓冲液,把它挤着,那样好看
   调调上样量,3,5的有点多,2,4的有点少
   跑的稍有点弯,还可以,最好不变电压跑完,80v(我常用,仅供参考)

电泳上下槽的电泳液 是一样的,一般上槽我会用新的,下槽用旧的。 不缺钱,就全新的

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我的路靠我的脚踩出来!!!不走寻常路!!!
2楼2012-03-26 16:54:31
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telomerase

至尊木虫 (著名写手)

cain

不行,蛋白定个量,统一下
我的路靠我的脚踩出来!!!不走寻常路!!!
3楼2012-03-26 16:56:11
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若然飞翔

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
cxch1224: 金币+1, 有帮助, 谢谢 2012-03-27 19:01:16
二楼说的很有道理,还有一个是你的胶浓度,我们8K左右的蛋白用15%的胶,250K左右的用6%的胶,30K左右的用12.5%胶,都有不错的结果
4楼2012-03-27 08:17:56
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