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tancf

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】SDS-PAGE配胶,这是怎么了?~~

这一段时间配胶,反复出现一个问题:配的胶凝固之后有花纹,像小山一样的花纹,并且与底部胶条接触胶边缘呈现不规则花边状。
我配的是10%的胶,1.5mm, 玻璃板、架子什么的都是Tanon的,溶液都是很配的,尤其是AP(10%)。配胶的时候玻璃板用洗洁精洗的干干净净,去离子水冲,烘箱烘干后用。分离胶10ml加入100ul的AP(10%),和6ul的Tamed,之后仔细的混好(刚开始以为是没混匀,所以再做的时候都混挺久的),分离胶加入后,用酒精压平。
结果问题出来了……总是有小山样的花纹,胶还有点发白,凝的时间也较长,要一个小时。
以前配胶挺正常的,没有出现过这种情况,这几天配胶重复了很多次都这样。实验室其他同学也偶有类似情况出现,不过也不知道怎么就好了,近期他们配的都挺好的。今天我特意让一个同学和我一起配,结果都出现了小山……
因为是要做western,所以这胶要配好啊。不知道有没有虫虫遇到了和我一样的问题,请大家不吝赐教,说说到底是哪出现了问题,或者应该注意什么。
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xmasylm

铜虫 (初入文坛)

是不是某些试剂长毛了
2楼2010-10-16 00:19:43
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tancf

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by xmasylm at 2010-10-16 00:19:43:
是不是某些试剂长毛了

应该还好,试剂都是亲配的。
3楼2010-10-16 09:02:57
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tianhuijuan

金虫 (小有名气)

同样关注答案..
4楼2010-10-16 09:21:19
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tianhuijuan

金虫 (小有名气)

所用器材没问题吧?
5楼2010-10-16 09:23:00
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王会征

铁杆木虫 (著名写手)

★
lstt09nk(金币+1):鼓励~ 2010-10-16 09:55:30
tancf(金币+1): 2010-10-16 16:32:30
有杂质,不干净。胶也有气泡,说明配胶质量很差。
6楼2010-10-16 09:39:42
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piratenb

新虫 (小有名气)

把东西都重新配一下好 了
眼的世界
7楼2010-10-16 10:04:21
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stliimoon

金虫 (小有名气)

我建议楼上的方法,这是最直接的方法,也最有效
8楼2010-10-16 14:50:32
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wenf98

木虫 (正式写手)

tancf(金币+1): 2010-10-16 16:32:49
丙烯酰胺母液不好,重新配吧,10ml体积, 40ul AP , 8ul TEMED试试看.胶板最好干燥好.
9楼2010-10-16 15:35:23
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tancf

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 王会征 at 2010-10-16 09:39:42:
有杂质,不干净。胶也有气泡,说明配胶质量很差。

下面没有凝固,所以有泡泡……
10楼2010-10-16 16:30:56
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