| 查看: 3132 | 回复: 1 | |||
xuanyuanhu木虫 (著名写手)
|
[求助]
pGEX-4T-1载体 已有1人参与
|
| pGEX-4T-1表达载体，在大肠杆菌中的表达效果如何？对于大蛋白（>100kDa）呢？膜蛋白呢？急求，。。 |
回复此楼» 猜你喜欢
297求调剂
已经有7人回复
-
343求调剂
已经有3人回复
-
085600，专业课化工原理，321分求调剂
已经有5人回复
-
311求调剂
已经有5人回复
-
南京大学化学调剂
已经有6人回复
-
一志愿华东师范大学有机化学专业，初试351分，复试被刷求调剂!
已经有4人回复
-
298求调剂
已经有4人回复
-
材料学硕333求调剂
已经有11人回复
-
0856求调剂
已经有7人回复
-
356求调剂
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- pgex 4t-1载体 无须诱导
已经有8人回复
- 关于PCR连接后菌液鉴定的问题
已经有18人回复
- pET-28a与pGEX-4T-1表达蛋白的区别
已经有10人回复
- 菌液PCR出现问题了
已经有23人回复
- PGEX-6P-1 载体构建 求帮忙
已经有10人回复
- PGEX-4T-1载体表达产物，GST标签的切除
已经有15人回复
- 关于启动子融合载体的构建
已经有3人回复
- 我的真菌原始菌株里面有螨虫怎么办？
已经有20人回复
- 原核表达载体的构建
已经有37人回复
- 构建了个基因的表达载体，发现有一个氨基酸发生突变
已经有10人回复
- 原核表达载体构建，测序不成功
已经有20人回复
- 真核表达载体 原核 区别与扩增
已经有8人回复
- T7载体的IPTG诱导
已经有10人回复
- 原核表达蛋白诱导不出来
已经有16人回复
- 【求助/交流】大家有用到过什么过表达的载体吗？需要诱导剂诱导吗？
已经有15人回复
- 【求助/交流】十万火急，IPTG诱导是怎么回事，给我说个大概
已经有9人回复
- 【求助/交流】pGEX-4T-1质粒的抗性是什么？
已经有9人回复
- 【求助/交流】原核表达载体pGEX-4T-1对应的表达菌株
已经有6人回复
【答案】应助回帖
| pGEX4T-1是常见的原核表达载体，在大肠杆菌中能用IPTG诱导表达出带有GST tag的融合蛋白，用亲和层析纯化可以得到纯度很高的目的蛋白。一般来说，由于启动子不同，pGEX系列载体在大肠杆菌中的表达量不如pET系列载体的高，但是由于作为tag的GST具有不错的维持蛋白稳定及增加溶解度的能力，因此表达出的可溶性蛋白（即折叠结构正确的蛋白）也不一定就比pET系列少。对于大分子量蛋白来说，鉴于上述GST优点，可以尝试纯化一下，但大蛋白本来折叠正确的难度就大，tag的优化作用很有限，最终能否纯化出来还是要看蛋白自身的属性。至于你说的膜蛋白嘛，呃，只能说载体已经不怎么重要了，因为普遍很难纯化，选什么载体要看你的后续纯化路线。 |
2楼2015-01-21 01:25:44
