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kongfu95

银虫 (小有名气)

[求助] western求助 已有3人参与

我提的心肌细胞蛋白
上样30ul(故意用的最大量)
电泳:80V 30min   120V  90min
转膜:300mA 90min
           还试过 70V  120min
转完以后用丽春红染色  看不到条带
有时候marker还留在胶上。
求解啊  是不是没转上啊
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董博士

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你在分离胶中的时间有点长了,一般是20min,还有你的marker还在胶中,说明转膜没成功,需要重新优化你的转膜条件,包括电压、时间、转印液等,还有你转印过程中膜、滤纸放置是否对!
医学&统计学
3楼2014-11-26 08:14:37
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biotech_zhou

木虫 (著名写手)

待人以诚:专业/专注/专心

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kongfu95: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-12-04 10:39:35
蛋白内参也没有么,可以染一下胶。
年末优惠荧光定量pcr、WB、ELISA技术服务一律六折!交流锤炼知识,用心构筑桥梁,以更优质的产品及技术服务助力科研;QQ:2513165427;Email:b
2楼2014-11-25 10:55:50
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西昆仑

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你用的时PVDF膜吗?用前是否用甲醇激活了?
欢迎同行交流
4楼2014-11-26 13:29:25
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