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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 琼脂糖凝胶回收DNA
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镜子的诱惑

铜虫 (小有名气)

[求助] 琼脂糖凝胶回收DNA 已有3人参与

我用生工生物公司的琼脂糖凝胶回收试剂盒回收DNA,回收产物浓度40左右，但A260/A280=1.91，A260/A230=0.10，且在260nm处没有吸收峰，或在230nm处有微弱吸收峰。请各位帮忙分析一下原因，加急。谢谢！
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1楼 2014-11-15 15:10:49
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liuderong

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-11-16 18:59:29
回收之后再跑个电影看看，这样更加明了。测定吸光度有异常可能是DNA有问题，也有可能是仪器的问题。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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2楼2014-11-15 20:51:45
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董博士

金虫 (正式写手)
★
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-11-16 18:59:38
一般在DNA测定中A260/A280=1.91介于1.8至2.0之间就默认所收集的DNA已经完全满足常规的应用，其它参数一般不作考虑，核酸的测定往往受到很多因素的影响，比如温度、仪器稳定性、核酸完整性、提取过程中的操作及所用的试剂等等，可以将所提的核酸再跑一次琼脂糖凝胶电泳看看条带
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医学&统计学
3楼2014-11-16 00:11:12
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意萧02

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-11-16 18:59:50
在1.8到2.1之间都可以。

[ 发自小木虫客户端 ]
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4楼2014-11-16 08:36:16
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镜子的诱惑

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 董博士 at 2014-11-16 00:11:12
一般在DNA测定中A260/A280=1.91介于1.8至2.0之间就默认所收集的DNA已经完全满足常规的应用，其它参数一般不作考虑，核酸的测定往往受到很多因素的影响，比如温度、仪器稳定性、核酸完整性、提取过程中的操作及所用的 ...

好的，谢谢。
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5楼2014-11-16 10:45:24
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镜子的诱惑

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 意萧02 at 2014-11-16 08:36:16
在1.8到2.1之间都可以。

主要是没有峰值，有点不放心。
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6楼2014-11-16 10:45:45
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镜子的诱惑

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by liuderong at 2014-11-15 20:51:45
回收之后再跑个电影看看，这样更加明了。测定吸光度有异常可能是DNA有问题，也有可能是仪器的问题。

好的，谢谢。
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7楼2014-11-16 10:46:03
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★
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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-11-16 19:00:01
如果胶回收的话，吸光度值在1.91是没有问题的，再说你的回收浓度有点低，纯度就是次要的了，不放心的话跑个胶试试吧
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···
8楼2014-11-16 16:08:35
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镜子的诱惑

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 小冀- at 2014-11-16 16:08:35
如果胶回收的话，吸光度值在1.91是没有问题的，再说你的回收浓度有点低，纯度就是次要的了，不放心的话跑个胶试试吧

好的，多谢 啊
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9楼2014-11-16 16:38:26
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意萧02

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by 镜子的诱惑 at 2014-11-16 10:45:45
主要是没有峰值，有点不放心。...

直接跑胶看看就行，看的是结果，测的有误差的

[ 发自小木虫客户端 ]
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10楼2014-11-16 18:23:37
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