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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 收工回收琼脂糖凝胶DNA片段
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luhaoHuang

铜虫 (小有名气)

[交流] 收工回收琼脂糖凝胶DNA片段 已有9人参与

RT，现在需要用手工回收琼脂糖凝胶中20-30kb左右的目的片段，请问给位有什么好方法吗，有操作步奏共享一下吗，非常感激
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1楼 2012-09-13 12:29:22
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weishu杯子

银虫 (初入文坛)
★
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可以用胶回收试剂盒回收
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快乐源于生活!!
2楼2012-09-13 12:40:52
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junminh

铜虫 (小有名气)
★
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这个大片段的用凝胶回收试剂盒是行不通的，回收的效果不好。尝试用沉淀或磁珠法回收。
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3楼2012-09-13 13:59:21
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luhaoHuang

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by junminh at 2012-09-13 13:59:21
这个大片段的用凝胶回收试剂盒是行不通的，回收的效果不好。尝试用沉淀或磁珠法回收。

请问沉淀的方法是如何操作呢，用什么方法融胶，还有要一些缓冲溶液么，谢谢
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4楼2012-09-13 21:30:19
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luhaoHuang

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by weishu杯子 at 2012-09-13 12:40:52
可以用胶回收试剂盒回收

试剂盒对大片段回收的效果非常差呀
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5楼2012-09-13 21:31:02
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jl860822

金虫 (正式写手)
★
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20-30kb的如果用胶回收试剂盒的话，可能会有损失，你试试分子克隆上推荐的硫酸铵沉淀的方法吧，这样可能会靠谱点
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6楼2012-09-14 08:47:58
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jl860822

金虫 (正式写手)
看来你是要构建文库使用的，这个片段是不是有点小了？
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7楼2012-09-14 08:52:29
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wu_shiyong

银虫 (正式写手)
建议用磁珠法！
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低调稳重务实内敛---------------残
8楼2012-09-14 09:00:52
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秋水之梦

金虫 (初入文坛)
★
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在紫外灯下，手工切胶
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你是我永远的诗
9楼2012-09-14 10:50:43
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yuhan131481

铁虫 (小有名气)
★
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我们做胶回收都是用的试剂盒 简单方便快捷  其他的没用过
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10楼2012-09-14 16:06:05
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