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luhaoHuang

铜虫 (小有名气)

[交流] 收工回收琼脂糖凝胶DNA片段 已有9人参与

RT,现在需要用手工回收琼脂糖凝胶中20-30kb左右的目的片段,请问给位有什么好方法吗,有操作步奏共享一下吗,非常感激
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weishu杯子

银虫 (初入文坛)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以用胶回收试剂盒回收
快乐源于生活!!
2楼2012-09-13 12:40:52
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junminh

铜虫 (小有名气)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
这个大片段的用凝胶回收试剂盒是行不通的,回收的效果不好。尝试用沉淀或磁珠法回收。
3楼2012-09-13 13:59:21
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luhaoHuang

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by junminh at 2012-09-13 13:59:21
这个大片段的用凝胶回收试剂盒是行不通的,回收的效果不好。尝试用沉淀或磁珠法回收。

请问沉淀的方法是如何操作呢,用什么方法融胶,还有要一些缓冲溶液么,谢谢
4楼2012-09-13 21:30:19
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luhaoHuang

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by weishu杯子 at 2012-09-13 12:40:52
可以用胶回收试剂盒回收

试剂盒对大片段回收的效果非常差呀
5楼2012-09-13 21:31:02
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jl860822

金虫 (正式写手)


★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
20-30kb的如果用胶回收试剂盒的话,可能会有损失,你试试分子克隆上推荐的硫酸铵沉淀的方法吧,这样可能会靠谱点
6楼2012-09-14 08:47:58
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jl860822

金虫 (正式写手)


看来你是要构建文库使用的,这个片段是不是有点小了?
7楼2012-09-14 08:52:29
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wu_shiyong

银虫 (正式写手)

建议用磁珠法!
低调稳重务实内敛---------------残
8楼2012-09-14 09:00:52
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秋水之梦

金虫 (初入文坛)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
在紫外灯下,手工切胶
你是我永远的诗
9楼2012-09-14 10:50:43
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yuhan131481

铁虫 (小有名气)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我们做胶回收都是用的试剂盒 简单方便快捷  其他的没用过
10楼2012-09-14 16:06:05
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