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蜂鸟404

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] 如何将一段24bp的序列加入基因后面 已有4人参与

我做的是细菌中蛋白质与DNA的相互作用,我想用染色质免疫共沉淀的方法通过蛋白质来找其相互作用的DNA,然后分析,现在我有一个flag的抗体,我不知道要把这个标签加到蛋白的基因5‘端还是3’端,还有我想通过同源重组的方式来把这小段序列加上去,这个引物要怎么设计呢,
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ncuduhan

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流经验! 2014-10-31 22:18:25
我去  如果只要加上24bp的话直接在引物上加上啊,我加过60多bp的都可以加上,妥妥的,没必要同源什么的
2楼2014-10-31 21:10:32
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励交流! 2014-11-02 22:25:59
直接设计引物,通过PCR加上去,加24bp根本不是问题。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
3楼2014-10-31 22:49:08
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dongdekun

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励交流! 2014-11-02 22:26:07
设计引物时直接把相关序列加在引物上(注意序列方向不要搞错),即可轻松搞定。。。
4楼2014-11-02 12:42:56
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sylar1022

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励交流! 2014-11-02 22:26:18
加在引物上pcr就行了。。。

[ 发自小木虫客户端 ]
5楼2014-11-02 14:08:59
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啊咩咩咩咩~

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ncuduhan at 2014-10-31 21:10:32
我去  如果只要加上24bp的话直接在引物上加上啊,我加过60多bp的都可以加上,妥妥的,没必要同源什么的

但是这样引物长度不会太长了吗?引物过长不是会导致退火温度过高这样也会p不出来啊?

发自小木虫Android客户端
6楼2020-05-20 21:21:46
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本帖内容被屏蔽

7楼2020-05-21 23:23:57
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