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蜂鸟404

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] 如何将一段24bp的序列加入基因后面已有4人参与

我做的是细菌中蛋白质与DNA的相互作用，我想用染色质免疫共沉淀的方法通过蛋白质来找其相互作用的DNA，然后分析，现在我有一个flag的抗体，我不知道要把这个标签加到蛋白的基因5‘端还是3’端，还有我想通过同源重组的方式来把这小段序列加上去，这个引物要怎么设计呢,
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1楼2014-10-31 11:43:10
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ncuduhan

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流经验！ 2014-10-31 22:18:25
我去  如果只要加上24bp的话直接在引物上加上啊，我加过60多bp的都可以加上，妥妥的，没必要同源什么的
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2楼2014-10-31 21:10:32
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励交流！ 2014-11-02 22:25:59
直接设计引物，通过PCR加上去，加24bp根本不是问题。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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3楼2014-10-31 22:49:08
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dongdekun

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励交流！ 2014-11-02 22:26:07
设计引物时直接把相关序列加在引物上（注意序列方向不要搞错），即可轻松搞定。。。
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4楼2014-11-02 12:42:56
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sylar1022

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励交流！ 2014-11-02 22:26:18
加在引物上pcr就行了。。。

[ 发自小木虫客户端 ]
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5楼2014-11-02 14:08:59
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啊咩咩咩咩~

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ncuduhan at 2014-10-31 21:10:32
我去  如果只要加上24bp的话直接在引物上加上啊，我加过60多bp的都可以加上，妥妥的，没必要同源什么的

但是这样引物长度不会太长了吗？引物过长不是会导致退火温度过高这样也会p不出来啊？

发自小木虫Android客户端
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6楼2020-05-20 21:21:46
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等你的时候

禁虫
本帖内容被屏蔽
7楼2020-05-21 23:23:57
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