24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1679  |  回复: 12

卓尔不凡2012

银虫 (正式写手)

[求助] 基因合成了3200bp的一段序列,设计错误酶切位点导致目的基因不能切下,求办法!! 已有3人参与

本人基因合成了3200bp的一段序列,但是由于设计错误酶切位点,能将目的基因也切断,所以不能将完整的3200bp切下,用PCR扩增条带杂乱,求办法,求高人指点,不胜感激
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

重组的景区

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

卓尔不凡2012

银虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by lihe131 at 2014-03-15 12:26:03
自己做就行啊,quich change 就是做一次PCR,P的质粒而已啊。...

请问quickchange使用的哪家的试剂盒?
7楼2014-03-15 16:30:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lihe131

至尊木虫 (文坛精英)

就正常PCR就好啊,产物用DpnI把模板消化,然后转化就好了。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

8楼2014-03-15 22:28:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

lihe131

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
卓尔不凡2012(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-03-15 10:40:59
卓尔不凡2012: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-03-15 16:30:41
合成的序列是在质粒里吗?
如果是的话,可以用quick change把合成错误的序列点突变纠正过来,楼主不要着急,问题很好解决的。
2楼2014-03-15 09:53:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuderong

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
卓尔不凡2012(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-03-15 10:41:16
卓尔不凡2012: 金币+38, ★★★很有帮助, 10 2014-03-15 16:31:03
我对你的问题的理解是:你设计在片段两端的酶切位点在片段中间也有,做酶切时除了两边切断外,中间也切断了。这样的话可以设计一对引物,引物两端换上正确的酶切位点就行了。如果是在片段内部设计错误,那就做点突变变回来吧。
3楼2014-03-15 10:16:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangpeng227

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
部分酶切就可以了,电泳后回收目的片段
4楼2014-03-15 10:32:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

卓尔不凡2012

银虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lihe131 at 2014-03-15 09:53:11
合成的序列是在质粒里吗?
如果是的话,可以用quick change把合成错误的序列点突变纠正过来,楼主不要着急,问题很好解决的。

请问基因合成公司可以做点突变吗?

[ 发自小木虫客户端 ]
5楼2014-03-15 12:18:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lihe131

至尊木虫 (文坛精英)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 卓尔不凡2012 at 2014-03-15 12:18:08
请问基因合成公司可以做点突变吗?
...

自己做就行啊,quich change 就是做一次PCR,P的质粒而已啊。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

6楼2014-03-15 12:26:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sinoer

铜虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

9楼2014-03-16 02:58:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

卓尔不凡2012

银虫 (正式写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by sinoer at 2014-03-16 02:58:39
如果是基因合成公司给你搞错的,那这公司也太不专业了...

是我自己失误设计错误的。
10楼2014-03-16 10:51:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 卓尔不凡2012 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0703化学321分求调剂 +16 三dd. 2026-03-30 17/850 2026-04-05 15:21 by anoxiaccc
[考研] 348求调剂 +5 wukira 2026-04-04 5/250 2026-04-05 11:05 by xiayan13521
[考研] 生物工程求调剂 +6 喜欢还是不甘心 2026-04-05 6/300 2026-04-05 10:28 by 唐沐儿
[考研] 材料与化工306分找调剂 +23 沧海轻舟e 2026-04-02 27/1350 2026-04-04 21:52 by laoshidan
[考研] 一志愿安徽某211 0703化学总分339求调剂 +6 晚风不晚 2026-04-04 6/300 2026-04-04 20:11 by dongzh2009
[考研] 求调剂,一志愿南京航空航天大学 ,080500材料科学与工程学硕 +10 @taotao 2026-04-03 10/500 2026-04-04 09:01 by T可可西里T
[考研] 考研调剂 +3 15615482637 2026-04-03 3/150 2026-04-03 22:50 by ms629
[考研] 求调剂 +8 akdhjs 2026-04-03 8/400 2026-04-03 18:17 by 戴维ING
[考研] 机械专硕297 +3 Afksy 2026-04-03 3/150 2026-04-03 14:24 by 1753564080
[考研] 282求调剂 不挑专业 求收留 +7 Yam. 2026-03-30 8/400 2026-04-03 14:12 by zhangdingwa
[考研] 319求调剂 +18 太容易1018 2026-04-01 18/900 2026-04-03 11:18 by linyelide
[考研] 325分化学调剂 +5 15771691647 2026-04-02 5/250 2026-04-03 09:58 by ChemPharm
[考研] 085600,320分求调剂 +6 大馋小子 2026-04-02 6/300 2026-04-02 21:54 by dongzh2009
[考研] 321求调剂 一志愿 浙江工业大学生物医药 +5 嘿嘿HC 2026-04-01 6/300 2026-04-02 15:23 by sophie2180
[考研] 一志愿北京科技大学材料学硕328分求调剂 +6 1段时间 2026-03-31 7/350 2026-04-02 13:57 by 3041
[考研] 材料化工340求调剂 +5 jhx777 2026-03-30 5/250 2026-04-02 12:45 by smileboy2006
[考研] 一志愿北交大材料工程总分358 +8 cs0106 2026-04-01 9/450 2026-04-02 10:36 by 不吃魚的貓
[考研] 一志愿厦门大学化学工程(专硕)-数二英二406分-求调剂 +5 厦大化工 2026-04-01 5/250 2026-04-02 10:03 by jp9609
[考研] 353求调剂 +4 拉钩不许变 2026-04-01 4/200 2026-04-01 18:10 by 记事本2026
[考研] 哈尔滨工业大学材料与化工专硕378求调剂 +3 塔比乌斯 2026-03-30 3/150 2026-03-30 22:55 by 无际的草原
信息提示
请填处理意见