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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 手提的质粒转化后没长
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mr.clutch

新虫 (小有名气)

[求助] 手提的质粒转化后没长 已有3人参与

用分子克隆实验指南所讲的方法手提质粒，且浓度比试剂盒提的高。但最近两天把-20保存的手提质粒拿来做转化却没长出菌，以前拿手提的质粒做转化从未出现过此类现象。求大神指教
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1楼 2014-10-24 16:39:57
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
mr.clutch(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-10-24 20:30:34
你提取出来多长时间了，会不会因为时间太长导致浓度降低，所以转化效率降低了···
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···
2楼2014-10-24 19:35:49
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ncuduhan

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你可以对这个质粒做个鉴定，跑个电泳看看海有没有，然后再做一次转化！
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3楼2014-10-24 20:33:17
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ykluuniu

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-11-18 12:00:27
1.手提的浓度高？但是质量怎么样呢？A260/A280等；
2.有没有跑电泳确认，所手提的是不是你需要的东西？
3.LB平板，质粒的抗性等？
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4楼2014-10-24 21:19:20
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ykluuniu

金虫 (小有名气)
4.另外，你的感受态行不行？除了这种情况做一个阳性对照吧。
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5楼2014-10-24 21:21:14
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mr.clutch

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by ykluuniu at 2014-10-24 21:21:14
4.另外，你的感受态行不行？除了这种情况做一个阳性对照吧。

260/280正常，但跑胶结果与试剂盒相比暗很多
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6楼2014-11-18 00:31:51
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