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mr.clutch

新虫 (小有名气)

[求助] 手提的质粒转化后没长 已有3人参与

用分子克隆实验指南所讲的方法手提质粒,且浓度比试剂盒提的高。但最近两天把-20保存的手提质粒拿来做转化却没长出菌,以前拿手提的质粒做转化从未出现过此类现象。求大神指教
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小冀-

版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
mr.clutch(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-10-24 20:30:34
你提取出来多长时间了,会不会因为时间太长导致浓度降低,所以转化效率降低了···
···
2楼2014-10-24 19:35:49
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ncuduhan

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你可以对这个质粒做个鉴定,跑个电泳看看海有没有,然后再做一次转化!
3楼2014-10-24 20:33:17
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ykluuniu

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-11-18 12:00:27
1.手提的浓度高?但是质量怎么样呢?A260/A280等;
2.有没有跑电泳确认,所手提的是不是你需要的东西?
3.LB平板,质粒的抗性等?
4楼2014-10-24 21:19:20
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ykluuniu

金虫 (小有名气)

4.另外,你的感受态行不行?除了这种情况做一个阳性对照吧。
5楼2014-10-24 21:21:14
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mr.clutch

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by ykluuniu at 2014-10-24 21:21:14
4.另外,你的感受态行不行?除了这种情况做一个阳性对照吧。

260/280正常,但跑胶结果与试剂盒相比暗很多
6楼2014-11-18 00:31:51
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