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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 同时转化两个质粒
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sarahliu2009

金虫 (小有名气)

[求助] 同时转化两个质粒

想把两个质粒转化到同一菌株里，请问如何操作，和转化单一质粒相同只是把两个质粒都加进去吗？还是有其他的操作。谢谢
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1楼 2012-06-07 05:54:17
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dshlove

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+1, 鼓励交流 2012-06-08 23:00:06
sarahliu2009: 金币+3 2012-09-19 03:28:29
按照正常操作去转化，把质粒打到感受态细胞中，静置30min后热激，再静置5min,加上培养基摇2小时涂板。注意板中要加两种质粒的抗生素就行。
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2楼2012-06-07 09:53:24
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microblue

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一个个转，两个一起转进去的概率很低。
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3楼2012-06-07 13:09:28
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zc10052157

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
两个质粒抗性要不一样  双抗选择  双质粒菌种的稳定性没保障
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hold住
4楼2012-06-07 13:57:56
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酶切专家

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+2, 鼓励交流 2012-06-08 23:00:18
你的两个质粒必须具有不同的复制原点（即两者可以兼容），不同的筛选基因。满总这个条件就可以了，等分子数混合，就可以正常转化了
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5楼2012-06-07 20:30:58
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lanjb1013

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我们是双抗双转，效率可能低。转化后，可以通过pcr检测？
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6楼2012-06-08 21:04:50
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