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luo_jiaojiao

木虫 (正式写手)

[求助] MRC-5细胞培养出现问题,求助已有7人参与

九月份从中科院上海细胞库新买的MRC-5细胞,买回来的细胞活性很好,传代后生长速度也很快,后面用90%的血清和10%的DMSO冻存了,最近复苏冻存的细胞,先是复苏到12.5cm2的小培养瓶中,细胞状态很好,铺满整个瓶底,然后再消化转移到25cm2的培养瓶中,就出现了图片中的问题,已经重复过两次,情况都一样,这是为什么呢?

MRC-5细胞培养出现问题,求助
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MRC-5细胞培养出现问题,求助-1
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luo_jiaojiao

木虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by fireme33 at 2014-11-23 21:12:07
您好。。我是苏州大学药学院这边的
在上海细胞库我也买过MRC-5
发现
1 上海细胞没有美国ACTT细胞库好
2 这个细胞拿回来前三代长得非常快,后面就不行了。。大概要1星期
3 最好用DMEM养,MEM我试过效果很不好酸 ...

对呀对呀,情况真的一样哎,刚买回来特别满,一传二后第二天就长满了,后面就变慢了,我以为是代数多了的原因就没在意,那你冻存后有出现过类似的情况吗?回头我试试DMEM养……
9楼2014-11-24 16:32:11
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luo_jiaojiao

木虫 (正式写手)

很急呀,为虾米木有人回复,不要让我的帖子沉下去了呀
2楼2014-10-23 13:59:33
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CAPFHX

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by luo_jiaojiao at 2014-10-23 13:59:33
很急呀,为虾米木有人回复,不要让我的帖子沉下去了呀

我刚买来,昨天才换液。不过之前我养过HLF,都死了  刚开始状态不好 细胞感觉很瘦弱,而且时不时的就出现污染。我怀疑是支原体污染过,一直潜伏在细胞里,条件一旦合适就出现污染情况了
3楼2014-11-20 09:02:19
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gikyo

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

培养基有没有添加谷氨酰胺,没有的话试一试
4楼2014-11-20 11:51:23
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