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1楼2014-10-22 16:34:30

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CAPFHX

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2楼: Originally posted by luo_jiaojiao at 2014-10-23 13:59:33
很急呀，为虾米木有人回复，不要让我的帖子沉下去了呀

我刚买来，昨天才换液。不过之前我养过HLF，都死了刚开始状态不好细胞感觉很瘦弱，而且时不时的就出现污染。我怀疑是支原体污染过，一直潜伏在细胞里，条件一旦合适就出现污染情况了

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3楼2014-11-20 09:02:19

fireme33

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【答案】应助回帖

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luo_jiaojiao: 金币+5, ★有帮助 2014-11-24 16:38:45

您好。。我是苏州大学药学院这边的
在上海细胞库我也买过MRC-5
发现
1 上海细胞没有美国ACTT细胞库好
2 这个细胞拿回来前三代长得非常快，后面就不行了。。大概要1星期
3 最好用DMEM养，MEM我试过效果很不好酸碱度不对
4 建议你用小培养皿养，这个细胞要是传的太稀，基本长不起来，过2星期直接全部死完
祝你成功

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哭着哭着就笑了

8楼2014-11-23 21:12:07

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luo_jiaojiao

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很急呀，为虾米木有人回复，不要让我的帖子沉下去了呀

2楼2014-10-23 13:59:33

gikyo

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【答案】应助回帖

培养基有没有添加谷氨酰胺，没有的话试一试

4楼2014-11-20 11:51:23

sandancy123

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【答案】应助回帖

冻存细胞的冻存液是90%细胞生长培养基(基础培养基+10%血清)和10%DMSO，你的培养基可能偏酸，还有换换血清试试看

5楼2014-11-20 13:30:31

luo_jiaojiao

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4楼: Originally posted by gikyo at 2014-11-20 11:51:23
培养基有没有添加谷氨酰胺，没有的话试一试

买的MEM里面本身就含有L-谷氨酰胺呢

6楼2014-11-20 17:01:28

luo_jiaojiao

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5楼: Originally posted by sandancy123 at 2014-11-20 13:30:31
冻存细胞的冻存液是90%细胞生长培养基(基础培养基+10%血清)和10%DMSO，你的培养基可能偏酸，还有换换血清试试看

我们这边一般是用两种方法配制冻存液，一种是70%基础培养基+20%血清+10% DMSO，另一种是90%血清+10% DMSO，师兄说后者效果会好些，所以我都是按后面的方法冻存的。如果是冻存液有问题的话，复苏到比较小的瓶子的时候就应该出现问题啊，我的情况是复苏时形态和密度都没问题，把长满后的细胞转移到大一些的瓶子就出现了这个问题。

7楼2014-11-20 17:06:35

luo_jiaojiao

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8楼: Originally posted by fireme33 at 2014-11-23 21:12:07
您好。。我是苏州大学药学院这边的
在上海细胞库我也买过MRC-5
发现
1 上海细胞没有美国ACTT细胞库好
2 这个细胞拿回来前三代长得非常快，后面就不行了。。大概要1星期
3 最好用DMEM养，MEM我试过效果很不好酸 ...

对呀对呀，情况真的一样哎，刚买回来特别满，一传二后第二天就长满了，后面就变慢了，我以为是代数多了的原因就没在意，那你冻存后有出现过类似的情况吗？回头我试试DMEM养……

9楼2014-11-24 16:32:11

fireme33

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9楼: Originally posted by luo_jiaojiao at 2014-11-24 16:32:11
对呀对呀，情况真的一样哎，刚买回来特别满，一传二后第二天就长满了，后面就变慢了，我以为是代数多了的原因就没在意，那你冻存后有出现过类似的情况吗？回头我试试DMEM养……...

你是做肺纤维化方向么。。。方便留个QQ么

哭着哭着就笑了

10楼2014-11-24 18:53:34