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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » MRC-5细胞培养出现问题，求助
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luo_jiaojiao

木虫 (正式写手)

[求助] MRC-5细胞培养出现问题，求助已有7人参与

九月份从中科院上海细胞库新买的MRC-5细胞，买回来的细胞活性很好，传代后生长速度也很快，后面用90%的血清和10%的DMSO冻存了，最近复苏冻存的细胞，先是复苏到12.5cm2的小培养瓶中，细胞状态很好，铺满整个瓶底，然后再消化转移到25cm2的培养瓶中，就出现了图片中的问题，已经重复过两次，情况都一样，这是为什么呢？

MRC-5细胞培养出现问题，求助
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MRC-5细胞培养出现问题，求助-1
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MRC-5细胞培养出现问题，求助-2
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1楼2014-10-22 16:34:30
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CAPFHX

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by luo_jiaojiao at 2014-10-23 13:59:33
很急呀，为虾米木有人回复，不要让我的帖子沉下去了呀

我刚买来，昨天才换液。不过之前我养过HLF，都死了  刚开始状态不好 细胞感觉很瘦弱，而且时不时的就出现污染。我怀疑是支原体污染过，一直潜伏在细胞里，条件一旦合适就出现污染情况了
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3楼2014-11-20 09:02:19
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CAPFHX

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我知道是什么原因了  细胞老化  目前国内这种细胞都已经传了30几代了  我在昆明细胞库买的 已经传了34代，所一我每次买新的细胞过来传代4次就不行了   我查过 从买上海的细胞库买来的能传大概6代 北京的传4代 南京武汉的超不过6代  要想买代数靠前的只能买美国ATCC公司的  当然代数靠前也就越贵  1000块钱买来的这种细胞也只能传个6代左右了
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14楼2015-01-07 12:51:56
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CAPFHX

铁虫 (小有名气)
跟我的细胞一样
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15楼2015-01-07 12:54:18
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CAPFHX

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我是从暑假7月份就开始养细胞了  半年多了 我买过三株细胞  每次都是传代四五次就出问题  刚开始还以为是我操作技术不过关 让细胞收到潜伏的污染  一直在找原因  各种找条件找原因   不知为这细胞哭了多少次
  直到前几天我才知道真相  我买的细胞已经快老化了  所以我买过来再传几代就自然老化了
    据我调查 国内这种细胞都已传到30几代了  所以买回来穿几代就会出问题    我猜你的MRC-5也是老化了  一旦老化 是救不了的
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17楼2015-01-17 13:24:54
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CAPFHX

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
18楼: Originally posted by luo_jiaojiao at 2015-01-17 14:11:27
好吧，大家都这样说，养细胞的苦，哎，人艰不拆呀！...

你还在用MRC-5做实验吗？ 你有想法买国外ATCC公司的吗？ 咱们可以一起买  这样就便宜了
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19楼2015-01-17 16:08:01
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