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dshlove

木虫 (正式写手)

[求助] 求助……细胞培养,被污染 已有1人参与

CHO细胞转染后被污染
培养基泛白,没有刺激性气味,闻起来酸酸的,馊馊的,像是发酵了,但是显微镜下
观察是杆状的,运动很快,没有酵母的踪迹…………
加完次氯酸钠后,培养基颜色很深。
就是想知道有没有其他的细菌或者真菌会导致这样的结果……
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dshlove

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zzhwcz01 at 2012-12-19 20:31:06
有可能是黑胶虫污染,我碰见过,是血清的问题,细胞不是很重要的话,建议扔了。血清也要换的。本论坛上有相关的帖子可以搜来看看,好像还有视频呢。

我用的是无血清的培养基,不过还是要谢谢你。
4楼2012-12-20 12:46:51
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普通回帖

zzhwcz01

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
dshlove: 金币+3, 有帮助 2012-12-20 12:47:04
有可能是黑胶虫污染,我碰见过,是血清的问题,细胞不是很重要的话,建议扔了。血清也要换的。本论坛上有相关的帖子可以搜来看看,好像还有视频呢。
努力吧少年
2楼2012-12-19 20:31:06
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laoboshihou

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
dshlove: 金币+3, 有帮助 2012-12-20 12:47:15
可能是黑胶虫污染 建议所有的培养基,血清,全换掉!加大抗生素的浓度,因为中国的空气很脏!
3楼2012-12-20 09:23:48
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yeyu541200

新虫 (小有名气)


【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
dshlove: 金币+2, 有帮助 2012-12-20 16:34:42
1.建议你从你的实验操作习惯入手,很可能是你操作的时候把细菌带入
2.建议你将你的培养基做无菌测试实验,确定培养基能继续使用
3.不建议你加入抗生素,因为看到你是在转染的时候污染的,加入抗生素不利于表达
5楼2012-12-20 14:33:34
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dshlove

木虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by yeyu541200 at 2012-12-20 14:33:34
1.建议你从你的实验操作习惯入手,很可能是你操作的时候把细菌带入
2.建议你将你的培养基做无菌测试实验,确定培养基能继续使用
3.不建议你加入抗生素,因为看到你是在转染的时候污染的,加入抗生素不利于表达

谢谢回复。
针对你的回答:
我的control没有污染,所以,我觉得操作的问题可以排除了。
我们的培养基每批都会做无菌测试的,都没问题。昨天我们怀疑是DNA 的问题,将纯的DNA接到培养基中,结果污染了,同时做的其他条件都没污染,所以问题找到了,就是DNA 的问题。
现在纠结的是到底什么菌污染的,形态像大肠杆菌,可是污染的培养又不像以前的大肠杆菌污染的培养基那样……
我们转染是无血清无抗生素的。
总之谢谢你的回答。
6楼2012-12-20 16:34:27
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yeyu541200

新虫 (小有名气)


【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by dshlove at 2012-12-20 16:34:27
谢谢回复。
针对你的回答:
我的control没有污染,所以,我觉得操作的问题可以排除了。
我们的培养基每批都会做无菌测试的,都没问题。昨天我们怀疑是DNA 的问题,将纯的DNA接到培养基中,结果污染了,同时做的 ...

确定是质粒污染,那你直接用滤器滤一下在做转染就行了,祝你成功!!!
7楼2012-12-20 19:01:27
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王清洪

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
DNA转染前可以高速离心12000转5分钟,能达到除菌目的。
8楼2012-12-21 10:38:53
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dshlove

木虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by yeyu541200 at 2012-12-20 19:01:27
确定是质粒污染,那你直接用滤器滤一下在做转染就行了,祝你成功!!!...

嗯,谢谢
9楼2012-12-21 12:02:31
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A汪建华

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by dshlove at 2012-12-20 16:34:27
谢谢回复。
针对你的回答:
我的control没有污染,所以,我觉得操作的问题可以排除了。
我们的培养基每批都会做无菌测试的,都没问题。昨天我们怀疑是DNA 的问题,将纯的DNA接到培养基中,结果污染了,同时做的 ...

我培养的里面看着很多虫子似的东西在里面跑,顿时心凉了
心中有梦,地平线就不会太远!
10楼2015-01-19 19:06:57
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