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Annel

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】细胞污染 已有16人参与

请教大家在养细胞的过程中有没有出现过这种问题啊,
就是在这个季节细胞特别容易被污染,应该是霉菌吧,培养瓶里面长多了就是漂浮的白白的一层,培养板里也是,刚用酒精擦洗了培养箱紫外照射了,第2天就污染了,而且最近污染的特别快,该怎么办呐。
还有培养板里有时候i出现黑色的一团一团的东西,肯定不是死细胞,请问这是什么菌啊,严不严重?谢谢了先
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yidian1280

金虫 (正式写手)

Annel(金币+1): 2010-04-12 10:33
消毒过后,应该保证干燥度。
2楼2010-04-12 09:39:06
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Annel

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by yidian1280 at 2010-04-12 09:39:06:
消毒过后,应该保证干燥度。

谢谢你先,不过我们的培养箱里是干燥的啊
3楼2010-04-12 10:33:14
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王庭

木虫 (著名写手)

★ ★
1949stone(金币+2): 2010-04-12 11:20
Annel(金币+2): 2010-04-12 11:47
如果培养箱的消毒灭菌工作做好了的话,那就应该考虑培养瓶以及培养液的问题。培养瓶的消毒是否充分?培养液是否被污染?等等~~
努力做最好的自己!!
4楼2010-04-12 10:38:26
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angel2536

金虫 (著名写手)

★ ★
1949stone(金币+2): 2010-04-12 11:20
Annel(金币+2): 2010-04-12 11:47
太夸张了,处理后第二天就污染了?
那肯定处理的不彻底啊!
我们前几天刚处理过,把架子都卸了,108°干热灭菌6h,放回培养箱在120°湿热处理24h。单单紫外不能彻底解决吧
5楼2010-04-12 10:58:26
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yujiaping1

木虫 (著名写手)

Annel(金币+1): 2010-04-12 11:50
黑色的物质,可能是黑胶虫
看一下这篇文章吧
http://tong.dxy.cn/experiment/430/488/490/496/17438.htm
6楼2010-04-12 11:28:05
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dannel025

铁杆木虫 (正式写手)

★ ★
Annel(金币+2): 2010-04-12 11:51
amisking(金币+2): 2010-04-12 12:32
1. 种子细胞有无染菌
2. 培养基有无染菌
3. 灭菌设备是否有问题
4. 移液管、枪头、塞子、瓶盖是否勤换
5. 实验的操作间是否人流过多、空气流动过大
6. 是否所有在这个超净台操作的人都染菌、自己操作是否过关

感觉2、5的可能性大一点
7楼2010-04-12 11:36:28
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Annel

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by 王庭 at 2010-04-12 10:38:26:
如果培养箱的消毒灭菌工作做好了的话,那就应该考虑培养瓶以及培养液的问题。培养瓶的消毒是否充分?培养液是否被污染?等等~~

我们的培养瓶买的都是灭菌好了的,培养液的话,可能真有这方面的原因,我们用的胎牛血清是国产四季青的,1640是hyclone的,这个怎么看有没有污染呀
8楼2010-04-12 11:47:30
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Annel

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by angel2536 at 2010-04-12 10:58:26:
太夸张了,处理后第二天就污染了?
那肯定处理的不彻底啊!
我们前几天刚处理过,把架子都卸了,108°干热灭菌6h,放回培养箱在120°湿热处理24h。单单紫外不能彻底解决吧

谢谢指教,我估计是培养板的细胞里已经有了霉菌只是肉眼还看不到,所以张一段时间又出来了,您说的干热灭菌是怎么灭的,培养箱里120°湿热灭菌是在培养箱调高温度到120°吗
9楼2010-04-12 11:50:10
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Annel

金虫 (小有名气)

内容已删除
10楼2010-04-12 11:51:10
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