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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】细胞污染
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Annel

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】细胞污染 已有16人参与

请教大家在养细胞的过程中有没有出现过这种问题啊，
就是在这个季节细胞特别容易被污染，应该是霉菌吧，培养瓶里面长多了就是漂浮的白白的一层，培养板里也是，刚用酒精擦洗了培养箱紫外照射了，第2天就污染了，而且最近污染的特别快，该怎么办呐。
还有培养板里有时候i出现黑色的一团一团的东西，肯定不是死细胞，请问这是什么菌啊，严不严重？谢谢了先
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1楼 2010-04-12 09:23:30
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yidian1280

金虫 (正式写手)
Annel(金币+1): 2010-04-12 10:33
消毒过后，应该保证干燥度。
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2楼2010-04-12 09:39:06
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Annel

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by yidian1280 at 2010-04-12 09:39:06:
消毒过后，应该保证干燥度。

谢谢你先，不过我们的培养箱里是干燥的啊
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3楼2010-04-12 10:33:14
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王庭

木虫 (著名写手)
★ ★
1949stone(金币+2): 2010-04-12 11:20
Annel(金币+2): 2010-04-12 11:47
如果培养箱的消毒灭菌工作做好了的话，那就应该考虑培养瓶以及培养液的问题。培养瓶的消毒是否充分？培养液是否被污染？等等~~
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努力做最好的自己！！
4楼2010-04-12 10:38:26
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angel2536

金虫 (著名写手)
★ ★
1949stone(金币+2): 2010-04-12 11:20
Annel(金币+2): 2010-04-12 11:47
太夸张了，处理后第二天就污染了？
那肯定处理的不彻底啊！
我们前几天刚处理过，把架子都卸了，108°干热灭菌6h，放回培养箱在120°湿热处理24h。单单紫外不能彻底解决吧
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5楼2010-04-12 10:58:26
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yujiaping1

木虫 (著名写手)
Annel(金币+1): 2010-04-12 11:50
黑色的物质，可能是黑胶虫
看一下这篇文章吧
http://tong.dxy.cn/experiment/430/488/490/496/17438.htm
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6楼2010-04-12 11:28:05
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dannel025

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★
Annel(金币+2): 2010-04-12 11:51
amisking(金币+2): 2010-04-12 12:32
1. 种子细胞有无染菌
2. 培养基有无染菌
3. 灭菌设备是否有问题
4. 移液管、枪头、塞子、瓶盖是否勤换
5. 实验的操作间是否人流过多、空气流动过大
6. 是否所有在这个超净台操作的人都染菌、自己操作是否过关

感觉2、5的可能性大一点
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7楼2010-04-12 11:36:28
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Annel

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 王庭 at 2010-04-12 10:38:26:
如果培养箱的消毒灭菌工作做好了的话，那就应该考虑培养瓶以及培养液的问题。培养瓶的消毒是否充分？培养液是否被污染？等等~~

我们的培养瓶买的都是灭菌好了的，培养液的话，可能真有这方面的原因，我们用的胎牛血清是国产四季青的，1640是hyclone的，这个怎么看有没有污染呀
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8楼2010-04-12 11:47:30
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Annel

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by angel2536 at 2010-04-12 10:58:26:
太夸张了，处理后第二天就污染了？
那肯定处理的不彻底啊！
我们前几天刚处理过，把架子都卸了，108°干热灭菌6h，放回培养箱在120°湿热处理24h。单单紫外不能彻底解决吧

谢谢指教，我估计是培养板的细胞里已经有了霉菌只是肉眼还看不到，所以张一段时间又出来了，您说的干热灭菌是怎么灭的，培养箱里120°湿热灭菌是在培养箱调高温度到120°吗
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9楼2010-04-12 11:50:10
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Annel

金虫 (小有名气)
内容已删除
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10楼2010-04-12 11:51:10
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