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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » High-five 细胞培养问题
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liuliuhappy

新虫 (初入文坛)

[求助] High-five 细胞培养问题 已有3人参与

大家好，最近养high-five细胞，从别人那里拿的冻存细胞，养了一个多月了，一直养不好。细胞团块状生长，长着长着细胞里就会出现很多小泡，然后细胞就会死亡。一个月了细胞都没养活，现在都不知道该怎么办了......拿的时候别人说是用TNM-FH养的，我是用的hyclone的无血清培养基养的，但是也加了5%的血清，后天看养不活，血清含量提高到了10%，但是目前来看，细胞仍然养不活。。。。。。怎么办？？请求大侠帮助！！！
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1楼 2013-12-16 09:55:54
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doglet

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2013-12-16 18:15:51
昆虫细胞是比较娇贵的，问一问拿细胞的单位用的是什么培养基和血清，需要用那种血清和培养基复苏，并且培养的状态很好后，再慢慢的更换成自己用的系统。
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2楼2013-12-16 12:11:45
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zoe_ji

新虫 (小有名气)

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1、先确认他们那边用的是什么培养基和血清
2、你细胞里长小泡，最后变黑色么？细胞最后是不是都破了？
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3楼2013-12-16 14:09:33
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cgxmc01

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2013-12-16 18:16:08
不用血清，sf900培养基。
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4楼2013-12-16 14:26:18
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liuliuhappy

新虫 (初入文坛)
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3楼: Originally posted by zoe_ji at 2013-12-16 14:09:33
1、先确认他们那边用的是什么培养基和血清
2、你细胞里长小泡，最后变黑色么？细胞最后是不是都破了？

长小泡后细胞就慢慢破裂死了。。。。他们用的是TNM-FH培养基，加了5%的血清。我用的hyclone的SFM900II。拿的时候他们的细胞是2010年冻存的，是不是时间比较久，细胞活力及性质已经改变了呢？
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5楼2013-12-16 15:04:09
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liuliuhappy

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by cgxmc01 at 2013-12-16 14:26:18
不用血清，sf900培养基。

我用的就是SFM900II。拿的时候他们加血清了，所以我也加了5%后来又加了10%的血清。
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6楼2013-12-16 15:05:11
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liuliuhappy

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by doglet at 2013-12-16 12:11:45
昆虫细胞是比较娇贵的，问一问拿细胞的单位用的是什么培养基和血清，需要用那种血清和培养基复苏，并且培养的状态很好后，再慢慢的更换成自己用的系统。

自己的系统是sf9，所以培养基直接用的hyclone的SFM900II，因为这两种细胞基本上培养条件及温度都差不多，想着应该可以养活。
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7楼2013-12-16 15:06:36
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zoe_ji

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by liuliuhappy at 2013-12-16 15:04:09
长小泡后细胞就慢慢破裂死了。。。。他们用的是TNM-FH培养基，加了5%的血清。我用的hyclone的SFM900II。拿的时候他们的细胞是2010年冻存的，是不是时间比较久，细胞活力及性质已经改变了呢？...

可能感染支原体了，要当心。
一般换培养基会长得不好，不贴壁，但不至于养不活，没法传代。
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8楼2013-12-24 12:34:03
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