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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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镜子的诱惑

铜虫 (小有名气)

[求助] PCR拖带严重 已有4人参与

PCR扩增片段时,无目的条带,但泳道成弥散亮带,应该是拖带严重,多次这样,也曾用同样体系扩出过条带,不知是何原因,请各位多多指教。谢过!
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西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1、没有目的条带可以降低退火温度或者更换模板试试
2、有弥散条带可能是反应体系有污染,试着换别人的体系看看
植根于内心的修养;无需提醒的自觉;以约束为前提的自由;为别人着想的善良
4楼2014-10-15 19:07:09
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koujie1986

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
镜子的诱惑(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-10-15 19:04:24
既然扩出过目的片段,说明引物、模板本来是没问题的。
出现拖尾的可能原因是,气溶胶引起非特异扩增增多。建议你更换水、mix,操作台用1%次氯酸钠擦拭后再操作试试。
2楼2014-10-15 16:54:14
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镜子的诱惑

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by koujie1986 at 2014-10-15 16:54:14
既然扩出过目的片段,说明引物、模板本来是没问题的。
出现拖尾的可能原因是,气溶胶引起非特异扩增增多。建议你更换水、mix,操作台用1%次氯酸钠擦拭后再操作试试。

多谢。我试一下。多谢啊
3楼2014-10-15 18:47:22
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镜子的诱惑

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 西门吹雪170 at 2014-10-15 19:07:09
1、没有目的条带可以降低退火温度或者更换模板试试
2、有弥散条带可能是反应体系有污染,试着换别人的体系看看

换体系是改变体系的大小吗?我用的是20微升的体系,换别人的体系是什么意思啊 ,
5楼2014-10-16 10:43:46
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