| 查看: 3863 | 回复: 2 | ||
[求助]
求助qPCR标准曲线法 已有1人参与
|
|
刚接触qPCR,还不太了解具体的概念 请问qPCR标准曲线法获得标准曲线就是为了估算引物的效率吗？ 如果仅仅是为了估算引物效率，我的数据点不在标准曲线中间可以不可以？ 用于做标准曲线的样品需要独立重复三次吗？也就是说我要提取三次RNA?  如果我有DNA质粒，可以不可以用DNA做标准曲线？ |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有169人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求助qPCR,，引物的扩增效率，二聚体相关
已经有4人回复
- 求助QPCR扩增效率的影响因素
已经有10人回复
- 关于标准曲线遇到的一些问题
已经有7人回复
- QPCR扩增曲线异常
已经有12人回复
- RT-PCR的标准曲线的构建相关
已经有3人回复
- qPCR结果分析，相对定量
已经有3人回复
- QPCR之 扩增效率
已经有8人回复
- rt-qpcr标准曲线问题
已经有10人回复
- QPCR 溶解曲线
已经有9人回复
- qPCR的标准曲线成线性很差，扩增效率低，是什么原因
已经有6人回复
- qpcr 溶解曲线成了这个鬼样子 请问各位专家问题可能出在哪了
已经有9人回复
- RT-qPCR实验问题
已经有23人回复
- 有关标准曲线准确度、精密度和重复性实验的问题
已经有7人回复
- 铬标准曲线计算平衡浓度
已经有5人回复
- 紫外分光光度法标准曲线中标准溶液浓度太低吸光度很小不准确怎么办
已经有8人回复
- 一个关于qPCR标准曲线的问题。谢谢！
已经有12人回复
- 【求助】关于内标法的做标准曲线
已经有12人回复
- RT-QPCR绝对定量有几种方法
已经有3人回复
- 【求助/交流】QPCR结果显著性判断
已经有5人回复
- 【求助/交流】考马斯亮蓝法测定蛋白质的标准曲线
已经有9人回复
- 【求助/交流】相对定量可以不做标准曲线吗
已经有4人回复
416114799
至尊木虫 (知名作家)
- MolEPI: 4
- 应助: 707 (博后)
- 金币: 14791.3
- 散金: 1799
- 红花: 150
- 帖子: 9939
- 在线: 1608小时
- 虫号: 996663
- 注册: 2010-04-14
- 专业: 环境微生物学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
fuyuandj86(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-11-12 20:32:23
fuyuandj86: 金币+17 2014-11-12 23:13:55
fuyuandj86(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-11-12 20:32:23
fuyuandj86: 金币+17 2014-11-12 23:13:55
|
① 标曲有两个用处：用于估计效率；并且用于计算你扩增出来的东西的copy； ② 最好是你的样品出来的Ct值都落在标曲的中间，保证准确性，不过如果标曲的线性非常好，我觉得也未必； ③ 一般是做3-4个平行试验，你可以分别提RNA，然后把三个样品混在一起，再取三份跑qPCR；如果为了节约成本，你也可以尽量保证操作没有问题，你可以样品线混匀，再一次性提RNA，最后分成3份跑qPCR。 |
2楼2014-11-12 14:26:07
 |
3楼2014-11-12 15:06:48
20