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fang2010

铜虫 (正式写手)

[求助] 关于标准曲线遇到的一些问题已有3人参与

每次都用0.008 ,0.016 ,0.024 ,0.032 ,0.040 ,0.048 mg/ml的标准品做标准曲线,可是每一次拟合出来的公式都不一样,这是什么原因?标准品性质稳定,不会随稳定或者光照分解。我测样品的时候,应该用哪一个公式计算?是不是每一次测样品前都要先做标准曲线?
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亮亮xmlgxy

至尊木虫 (知名作家)

像向阳花一样绽放

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
费姚永芬: 金币+2 2014-07-16 14:34:10
fang2010: 金币+1 2014-07-16 15:25:23
不用每次都做标曲,在仪器稳定,标曲各个浓度基本没啥问题的前提下,选择线性最好,也就拟合度最高的线性方程,下次测样的时候把它调出来就行了。
阳光打在你的脸上,温暖留在我们心头
2楼2014-07-16 12:49:57
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liwentao2010

荣誉版主 (文坛精英)

山涛

优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
费姚永芬: 金币+2 2014-07-16 14:34:04
fang2010: 金币+2 2014-07-16 15:23:17
建议选择标准曲线的浓度对应的吸光度介于0.2-0.8之间,线性好,符合朗格比尔吸附定律。此外,波长的选取要选择吸光度最大的波长,减少误差。显色剂要用棕色瓶,冷藏,避免分解或氧化。
重做标线的情况:显色剂更换,或分光光度计纠刻系统。
注意事项:比色管一定要洗净,洗涤精洗,超声,酸泡,超声,去离子水洗。
加油!
3楼2014-07-16 13:04:50
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fang2010

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by liwentao2010 at 2014-07-16 13:04:50
建议选择标准曲线的浓度对应的吸光度介于0.2-0.8之间,线性好,符合朗格比尔吸附定律。此外,波长的选取要选择吸光度最大的波长,减少误差。显色剂要用棕色瓶,冷藏,避免分解或氧化。
重做标线的情况:显色剂更换 ...

那为什么我每次用相同的显色剂,相同的波长(最大波长),拟合出来的公式都不一样?吸光度也啊0.2-0.8之间。我配25ml液体,连着做两次标准曲线,两次得到的公式都不一样
4楼2014-07-16 15:25:03
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fang2010

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 亮亮xmlgxy at 2014-07-16 12:49:57
不用每次都做标曲,在仪器稳定,标曲各个浓度基本没啥问题的前提下,选择线性最好,也就拟合度最高的线性方程,下次测样的时候把它调出来就行了。

我想知道正确的做法,标准的做法。你的说法有依据吗?比如中国药典?
5楼2014-07-16 15:26:21
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liwentao2010

荣誉版主 (文坛精英)

山涛

优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主

引用回帖:
4楼: Originally posted by fang2010 at 2014-07-16 15:25:03
那为什么我每次用相同的显色剂,相同的波长(最大波长),拟合出来的公式都不一样?吸光度也啊0.2-0.8之间。我配25ml液体,连着做两次标准曲线,两次得到的公式都不一样...

公式有差异很正常,控制在误差允许的范围内就可以
加油!
6楼2014-07-16 18:12:32
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yangxiumin1985

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
要看两次做的结果差多少。如果相差在误差范围内,那这不是个事儿哈
7楼2014-07-17 11:02:02
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fang2010

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by yangxiumin1985 at 2014-07-17 11:02:02
要看两次做的结果差多少。如果相差在误差范围内,那这不是个事儿哈

相差多少算是在误差范围内?
8楼2014-07-20 12:38:11
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