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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 2600bp基因扩增
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hajierlove

铜虫 (正式写手)

[求助] 2600bp基因扩增 已有6人参与

2600bp基因扩增，用green mix,pcr体系，模板，引物各1u，水，9.5，mix12.5.反应程序，95度2min，95度30s，55度30s，72度3min，38个循环，72度5min。10保持。
大神们帮忙看看有什么问题，有没有好用一点的酶推荐
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踏实
1楼 2014-09-18 22:37:33
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我欲乘风归去

木虫 (正式写手)
★
hajierlove(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-09-19 16:29:27
你的片段是不是高GC含量的，试一试高GCbuffer的扩增酶。
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。
5楼2014-09-19 10:30:33
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hajierlove

铜虫 (正式写手)
试了很多次p不出来，其他700bp的都做到蛋白表达了，亲们，help
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踏实
2楼2014-09-18 22:38:18
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gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
hajierlove(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-09-19 16:29:16
知道序列直接去合成吧。
可以分段扩增，有个重叠就好

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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3楼2014-09-18 22:47:39
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kuenyunliu

铜虫 (初入文坛)
用Q5 或者phusion试试
你只问了要什么酶推荐 以上
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4楼2014-09-18 23:25:05
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