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为什么我的AOA的amoA基因扩增不亮
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[交流]
为什么我的AOA的amoA基因扩增不亮
最近一直在做 AOA的amoA基因的T-RFLP实验,用的引物是Arch-amoAF/AR,有些样品老是扩增不出来,不知道有哪些朋友也在做这方面的实验,请指教!
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2011-12-25 15:22:40
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):谢谢参与
wanhscn(金币+3): 鼓励交流!GOOD! 2011-12-27 16:16:09
偶做过。呵呵。
你要注意你的样品,如果样品中没有这个基因,肯定扩增不出呀。
我曾经对一批土壤样品扩增,发现无法扩增,定量也Ct值超大,无扩增条带。最终得出,样品中无AOA amoA基因的结论。
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2011-12-27 09:33:28
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鬼娃娃不要天(金币
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):谢谢参与
wanhscn(金币+3): 鼓励交流!有意思! 2011-12-27 16:16:32
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2楼
:
Originally posted by
在雨中
at 2011-12-27 09:33:28:
偶做过。呵呵。
你要注意你的样品,如果样品中没有这个基因,肯定扩增不出呀。
我曾经对一批土壤样品扩增,发现无法扩增,定量也Ct值超大,无扩增条带。最终得出,样品中无AOA amoA基因的结论。
那我敢保证你的出来的结论有点仓促了
aoa 在土壤环境中分布及其广泛 比AOB 数量和分布还广
扩不出来可能是DNA 质量不高 或者其他因素~~ 土壤中没有 可能性不大啊
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3楼
2011-12-27 09:50:23
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老夏853
at 2011-12-27 09:50:23:
那我敢保证你的出来的结论有点仓促了
aoa 在土壤环境中分布及其广泛 比AOB 数量和分布还广
扩不出来可能是DNA 质量不高 或者其他因素~~ 土壤中没有 可能性不大啊
呵呵。
有的土壤中有,有的土壤中没有。凡事无绝对。
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4楼
2011-12-27 12:03:38
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在雨中
at 2011-12-27 09:33:28:
偶做过。呵呵。
你要注意你的样品,如果样品中没有这个基因,肯定扩增不出呀。
我曾经对一批土壤样品扩增,发现无法扩增,定量也Ct值超大,无扩增条带。最终得出,样品中无AOA amoA基因的结论。
那请问你做的样品是什么生境的?选用什么限制性酶酶切?
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5楼
2012-02-11 19:52:46
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鬼娃娃不要天(金币+1): 谢谢参与
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在雨中
at 2011-12-27 09:33:28
偶做过。呵呵。
你要注意你的样品,如果样品中没有这个基因,肯定扩增不出呀。
我曾经对一批土壤样品扩增,发现无法扩增,定量也Ct值超大,无扩增条带。最终得出,样品中无AOA amoA基因的结论。
我这两天也遇到了同样的问题,三个样品,两个有结果,一个怎么都没有
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6楼
2014-03-11 14:20:11
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Originally posted by
老夏853
at 2011-12-27 09:50:23
那我敢保证你的出来的结论有点仓促了
aoa 在土壤环境中分布及其广泛 比AOB 数量和分布还广
扩不出来可能是DNA 质量不高 或者其他因素~~ 土壤中没有 可能性不大啊...
我用的是试剂盒提的,质量挺好啊!也是有一个样品没有,求分析
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7楼
2014-03-11 14:22:11
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鬼娃娃不要天(金币+1): 谢谢参与
请问楼主做出来了吗,我现在也是一直P不出来,一直找不到原因,各种方法都试过了~~~
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8楼
2014-06-11 16:11:55
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★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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7楼
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Originally posted by
haocuihua
at 2014-03-11 14:22:11
我用的是试剂盒提的,质量挺好啊!也是有一个样品没有,求分析
...
请问你用的什么试剂盒?哪个牌子的taq?PCR反应有没有加BSA?
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9楼
2014-06-12 10:56:49
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