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yinuohou

新虫 (初入文坛)

[求助] cDNA验证,PCR不出目的条带的原因 已有3人参与

最近一直在提RNA,反转录成cDNA,接着就是PCR验证cDNA,之前用同一个基因引物,PCR体系都一样的条件下,都能P出目的条带,且目的条带很亮很清晰,几乎没有引物二聚体,可是最近相同条件下提取的RNA,反转成cDNA后,在PCR验证的时候,前几天P出的目的条带亮度还行,但是跟之前比,暗很多,且有引物二聚体,并且很亮。今天继续提RNA,反转录cDNA,PCR验证的时候,居然P不出目的条带了,只有引物二聚体。有谁遇到过这种情况吗?求解,谢谢
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qapollo

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-09-14 23:50:31
看看你的引物是不是降解了,重新稀释干粉或者再合成一次
2楼2014-09-14 17:16:17
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