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hello_real

新虫 (初入文坛)

[求助] TEV蛋白酶酶切目的蛋白 已有1人参与

最近用自己纯化的TEV蛋白酶酶切目的蛋白以去除标签,但是切了好长时间都没有切开。之后变换了好多条件,比如更换TEV工作缓冲液,加入DTT等,都没有效果,目的蛋白的基因序列测序也没有突变,是否是酶切位点被被包在里面啦!还有其他的方法吗?
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34100313

铜虫 (正式写手)

楼主,你好,我在纯化蛋白时遇到了和你相似的问题,elute下来的蛋白跑了一下蛋白胶,确实有我的目的蛋白和MBPtag大小相当的那条带,但用TEV4度酶切并透析时却切不开,很是着急。能否告诉我一下楼主当时是怎么解决的?万分感谢
9楼2015-11-05 14:35:20
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bio_sci

捐助贵宾 (正式写手)


【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
hello_real: 金币+1, 有帮助, 虽没有帮助,还是鼓励一下! 2014-08-28 15:59:30
买商品化的tev酶,你自己做的估计纯化的时候失活了

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-08-27 16:05:35
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hello_real

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by bio_sci at 2014-08-27 16:05:35
买商品化的tev酶,你自己做的估计纯化的时候失活了

基本上不存在该种状况,已解决,谢谢!
3楼2014-08-28 15:58:52
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雷永兴

木虫 (小有名气)

生物小丑

引用回帖:
3楼: Originally posted by hello_real at 2014-08-28 15:58:52
基本上不存在该种状况,已解决,谢谢!...

怎么解决的?
爱拼才会赢!
4楼2014-08-29 15:32:04
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