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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

[求助] 有人用过TEV蛋白酶吗? 已有2人参与

我打算用TEV蛋白酶切除融合蛋白,有几个问题:
1. 用TEV蛋白酶洗脱目的蛋白的效果怎么样?
2. 融合蛋白的酶切序列处是否考虑空间位阻,即酶切序列前后是否要加氨基酸?
求经验,没做过的就不要捣乱了
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wmx551551

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
jurkat.1640: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-03-18 15:58:50
用TEV酶洗脱目的蛋白是几个意思?是加在柱子上一起过夜切吗?如果是的话,效果是可以的。
要考虑空间位阻的,酶切序列Q-G或者Q-S前后要加一些氨基酸。比如RSENLYFQGSDILQGT,中间有QG,两边加几个氨基酸。
2楼2014-03-18 15:31:19
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wmx551551 at 2014-03-18 15:31:19
用TEV酶洗脱目的蛋白是几个意思?是加在柱子上一起过夜切吗?如果是的话,效果是可以的。
要考虑空间位阻的,酶切序列Q-G或者Q-S前后要加一些氨基酸。比如RSENLYFQGSDILQGT,中间有QG,两边加几个氨基酸。

加什么样的氨基酸合适?
3楼2014-03-18 15:59:32
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wmx551551

新虫 (小有名气)

内容已删除
4楼2014-03-19 11:14:41
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songsongsa

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
jurkat.1640: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-03-21 17:18:17
这是之前用过的,两边加了几个aa linker  GGC GGA GGC TCA GAA AAC CTG TAT TTT CAG  GGC  GGA TCA GGC TCA  GGA  GGC
5楼2014-03-21 16:33:41
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