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jurkat.1640

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[求助] 有人用过TEV蛋白酶吗？已有2人参与

我打算用TEV蛋白酶切除融合蛋白，有几个问题：
1. 用TEV蛋白酶洗脱目的蛋白的效果怎么样？
2. 融合蛋白的酶切序列处是否考虑空间位阻，即酶切序列前后是否要加氨基酸？
求经验，没做过的就不要捣乱了

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1楼 2014-03-17 14:56:13

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wmx551551

新虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

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jurkat.1640: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-03-18 15:58:50

用TEV酶洗脱目的蛋白是几个意思？是加在柱子上一起过夜切吗？如果是的话，效果是可以的。
要考虑空间位阻的，酶切序列Q-G或者Q-S前后要加一些氨基酸。比如RSENLYFQGSDILQGT，中间有QG，两边加几个氨基酸。

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2楼2014-03-18 15:31:19

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jurkat.1640

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2楼: Originally posted by wmx551551 at 2014-03-18 15:31:19
用TEV酶洗脱目的蛋白是几个意思？是加在柱子上一起过夜切吗？如果是的话，效果是可以的。
要考虑空间位阻的，酶切序列Q-G或者Q-S前后要加一些氨基酸。比如RSENLYFQGSDILQGT，中间有QG，两边加几个氨基酸。

加什么样的氨基酸合适？

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3楼2014-03-18 15:59:32

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