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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 层析/纯化 » 有人用过TEV蛋白酶吗？
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

[求助] 有人用过TEV蛋白酶吗？ 已有2人参与

我打算用TEV蛋白酶切除融合蛋白，有几个问题：
1. 用TEV蛋白酶洗脱目的蛋白的效果怎么样？
2. 融合蛋白的酶切序列处是否考虑空间位阻，即酶切序列前后是否要加氨基酸？
求经验，没做过的就不要捣乱了
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1楼 2014-03-17 14:56:13
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wmx551551 at 2014-03-18 15:31:19
用TEV酶洗脱目的蛋白是几个意思？是加在柱子上一起过夜切吗？如果是的话，效果是可以的。
要考虑空间位阻的，酶切序列Q-G或者Q-S前后要加一些氨基酸。比如RSENLYFQGSDILQGT，中间有QG，两边加几个氨基酸。

加什么样的氨基酸合适？
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3楼2014-03-18 15:59:32
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wmx551551

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
jurkat.1640: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-03-18 15:58:50
用TEV酶洗脱目的蛋白是几个意思？是加在柱子上一起过夜切吗？如果是的话，效果是可以的。
要考虑空间位阻的，酶切序列Q-G或者Q-S前后要加一些氨基酸。比如RSENLYFQGSDILQGT，中间有QG，两边加几个氨基酸。
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2楼2014-03-18 15:31:19
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songsongsa

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
jurkat.1640: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-03-21 17:18:17
这是之前用过的，两边加了几个aa linker  GGC GGA GGC TCA GAA AAC CTG TAT TTT CAG  GGC  GGA TCA GGC TCA  GGA  GGC
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5楼2014-03-21 16:33:41
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