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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » TEV蛋白酶酶切目的蛋白
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hello_real

新虫 (初入文坛)

[求助] TEV蛋白酶酶切目的蛋白 已有1人参与

最近用自己纯化的TEV蛋白酶酶切目的蛋白以去除标签，但是切了好长时间都没有切开。之后变换了好多条件，比如更换TEV工作缓冲液，加入DTT等，都没有效果，目的蛋白的基因序列测序也没有突变，是否是酶切位点被被包在里面啦！还有其他的方法吗？
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1楼 2014-08-27 14:15:58
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bio_sci

捐助贵宾 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
hello_real: 金币+1, ★有帮助, 虽没有帮助，还是鼓励一下！ 2014-08-28 15:59:30
买商品化的tev酶，你自己做的估计纯化的时候失活了

[ 发自小木虫客户端 ]
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2楼2014-08-27 16:05:35
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hello_real

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by bio_sci at 2014-08-27 16:05:35
买商品化的tev酶，你自己做的估计纯化的时候失活了

基本上不存在该种状况，已解决，谢谢！
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3楼2014-08-28 15:58:52
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雷永兴

木虫 (小有名气)

生物小丑
引用回帖:
3楼: Originally posted by hello_real at 2014-08-28 15:58:52
基本上不存在该种状况，已解决，谢谢！...

怎么解决的？
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爱拼才会赢！
4楼2014-08-29 15:32:04
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zljsuny

铁杆木虫 (小有名气)
楼主是怎么解决的？我也出现类似情况，我的蛋白只是切开了一部分，大部分且不开。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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5楼2014-09-01 23:25:35
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雷永兴

木虫 (小有名气)

生物小丑
问题出在哪里？我也遇到类似问题！
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爱拼才会赢！
6楼2014-09-04 22:28:42
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树苗儿

禁虫 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
7楼2014-12-11 13:47:21
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树苗儿

禁虫 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
8楼2014-12-16 21:50:41
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34100313

铜虫 (正式写手)
楼主，你好，我在纯化蛋白时遇到了和你相似的问题，elute下来的蛋白跑了一下蛋白胶，确实有我的目的蛋白和MBPtag大小相当的那条带，但用TEV4度酶切并透析时却切不开，很是着急。能否告诉我一下楼主当时是怎么解决的？万分感谢
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9楼2015-11-05 14:35:20
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~沙~

禁虫
本帖内容被屏蔽
10楼2020-08-19 14:54:04
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