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xissy

铜虫 (小有名气)

[求助] 有谁做过酸裂解代替酶切的? 已有1人参与

如题。蛋白纯化时,经常用到酶切,酶切切除融合蛋白或者标签等。但是酶切对蛋白本身有要求,例如蛋白必须有正确的三级结构。有小伙伴做过酸裂解吗?例如甲酸或者盐酸裂解也可以识别一级氨基酸序列,并且对包涵体也有效的。目前我只看到这个方法可以针对小肽段,不知道能否针对完整蛋白的包涵体。请做过的同学分享下自己的经验吧~~
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fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲,勿施于人

那蛋白不都变性了吗?
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
2楼2014-08-26 03:09:00
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zhaodahe

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
xissy(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-08-26 22:03:54
那对氨基酸序列应该也有要求,否则就会随机断裂。既然有序列特异性,就有可能切目的蛋白吧?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
3楼2014-08-26 07:54:26
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xissy

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by zhaodahe at 2014-08-26 07:54:26
那对氨基酸序列应该也有要求,否则就会随机断裂。既然有序列特异性,就有可能切目的蛋白吧?

所以酶切氨基酸是不能包含在目的蛋白里的。
4楼2014-08-26 13:59:59
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