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applexixixi

木虫 (小有名气)

[求助] 亲们,有谁用过这几个酶切位点AlwI、AvaI、BsoBI、BseRI、BsiEI

最近在构建一个质粒,想切除一段序列,查了一下比较符合的酶切位点,有这么几个,AlwI、AvaI、BsoBI、BseRI、BsiEI,貌似都不是很常见,不知道虫友们是否用过,想知道酶切效果好不好。。。
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gywyl1977

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
AvaI用过,没有什么问题,可以用。
2楼2012-07-04 12:23:17
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chlorella409

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
用过Ava I,37一个小时,切的效果还可以
3楼2012-07-04 13:57:57
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applexixixi

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by gywyl1977 at 2012-07-04 12:23:17
AvaI用过,没有什么问题,可以用。

谢谢啦
4楼2012-07-05 09:57:37
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applexixixi

木虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by chlorella409 at 2012-07-04 13:57:57
用过Ava I,37一个小时,切的效果还可以

非常感谢!
5楼2012-07-05 09:57:53
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karlgu18

新虫 (小有名气)

★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-12-19 17:34:15
酶切问题也是一个有学问的问题
(1)查找供应这几种酶的供应商,比如invitrogen的目录,对自己出售的酶都有详细的介绍,包括加入量,反应体系温度,酶切效率等。
(2) 这几种酶没有见过,也没有用过
(3) 一般而言,酶切时间不超过4h,一般2-3h足够,ligase喜欢过夜,越晚酶活力降低,并且自身也会降解。酶量不超过体积的1/10.
6楼2012-12-19 10:14:35
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天蛇2012

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

Bste用过,NEB的酶,没有问题
7楼2012-12-19 16:22:45
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