| 查看: 4933 | 回复: 8 | ||
[求助]
测小鼠中血药浓度的几个问题
|
|
本人学化学的，对药代动力学方面不是很了解，有几个问题想请教大家： 1.用HPLC测血药浓度，取1ml 全血后，加1%肝素钠立即摇匀，离心3500转/分，10分钟，分离血浆。这个转速和时间可以吗？肝素钠加多少？ 2.沉淀蛋白：取血浆0.5ml，加甲醇（血浆：甲醇=3：1），旋涡1min，4000转/分，10分钟，取上清液，于50℃水浴氮气吹干，1mL超纯水复溶，旋涡1 min。什么叫旋涡？如果不氮气吹干，可否用其它方法？还有是否要复溶呢？ 3.准备用液-液萃取：甲醇溶解上述上清液，（有机相：水相=2：1），高速离心，请上清于HPLC进样测量。请问，除了甲醇还有别的溶剂可选择吗？我准备预实验时试一下。高速离心速度多少才合适，离心时间呢？ 4.我看还有个浓集的步骤，请问是怎么操作呢？ 5.这些操作，比如2中取血浆，用移液枪合适吗，还是要用微量注射器，移液管之类的呢？ 问题有点多，请了解的大侠们指点指点。谢谢。 |
回复此楼» 猜你喜欢
请问哪里可以有青B申请的本子可以借鉴一下。
已经有4人回复
-
真诚求助：手里的省社科项目结项要求主持人一篇中文核心，有什么渠道能发核心吗
已经有6人回复
-
孩子确诊有中度注意力缺陷
已经有14人回复
-
三甲基碘化亚砜的氧化反应
已经有4人回复
-
请问下大家为什么这个铃木偶联几乎不反应呢
已经有5人回复
-
请问有评职称，把科研教学业绩算分排序的高校吗
已经有5人回复
-
2025冷门绝学什么时候出结果
已经有3人回复
-
天津工业大学郑柳春团队欢迎化学化工、高分子化学或有机合成方向的博士生和硕士生加入
已经有4人回复
-
康复大学泰山学者周祺惠团队招收博士研究生
已经有6人回复
-
AI论文写作工具：是科研加速器还是学术作弊器？
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
不同前处理的小鼠静注同样量的药物2min后为什么血药浓度不一样？
已经有13人回复- 血中浓度太低，检测不出，跪求原因
已经有12人回复
- 测血药浓度，加入内标的体积多大为好？浓度如何选定？
已经有5人回复
- 小鼠血药浓度太低，液相分析出现未知峰，且峰面积很大，不知道该如何分析
已经有9人回复
- 药动学中血药浓度可疑值的取舍？
已经有21人回复
- 小鼠眼眶取血后离心血清的问题
已经有13人回复
- 建立体内药物分析方法，却不做药代，是否可行？？
已经有10人回复
- 剖取小鼠脑组织的问题，目的是测定脑组织内药物含量
已经有10人回复
- 【求助】请教HPLC测定血药跟尿液浓度时加入内标物的问题
已经有3人回复
2楼2012-05-11 13:00:05
rainbow_zyt
木虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 2226.4
- 散金: 10
- 红花: 2
- 帖子: 284
- 在线: 97.4小时
- 虫号: 1164464
- 注册: 2010-12-07
- 性别: GG
- 专业: 食品科学基础
【答案】应助回帖
★
感谢参与，应助指数 +1
豆哥: 金币+1, 谢谢参与交流 2012-05-14 08:58:50
感谢参与，应助指数 +1
豆哥: 金币+1, 谢谢参与交流 2012-05-14 08:58:50
|
问题一：转速和时间合适，肝素钠加入量的原则是：1ml的血液需要肝素0.1-0.2mg或者20IU（1mg相当于126IU），具体看你使用的肝素的活性配制一定浓度的水溶液就可以，这个量不要求太准确。 问题二：涡旋就是充分的混合，让蛋白质沉淀，让你的药物从蛋白质中释放出来。不用氮气吹干，可以用真空旋转蒸干，但是如果你的量很少的话，损失很严重，因此建议用氮气吹干，氮气又不贵。 问题三：液相流动相的选取是要参考你的目标检测物的，除了甲醇，还有乙腈等可以选择，乙腈的效果一般比甲醇好些，但是具体问题具体分析。 问题四：药物的浓缩富集有很多种方法，例如过柱子洗脱富集、蒸干溶剂富集等等，找到一种合适自己的，具体操作要看你选取什么样的富集方法。 问题五：移液枪当然操作起来比移液管之类的简单而且，对于微升级别体积的溶液你能用移液管吗？ 建议去图书馆找相关书籍看看 |
3楼2012-05-11 16:53:16
4楼2012-05-13 13:21:29
believe123
金虫 (初入文坛)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1068.9
- 红花: 1
- 帖子: 21
- 在线: 60.9小时
- 虫号: 1619707
- 注册: 2012-02-15
- 性别: MM
- 专业: 药剂学
5楼2012-06-01 16:31:47
【答案】应助回帖
|
1.用HPLC测血药浓度，现在管子中加10ul肝素，取0.3ml（太多老鼠要死了） 全血后，，离心8000转/分，5分钟，分离血浆。 2.沉淀蛋白：取血浆0.5ml，加甲醇（血浆：甲醇=3：1），旋涡1min，4000转/分，10分钟，取上清液，于50℃水浴氮气吹干，1mL超纯水复溶，旋涡1 min。什么叫旋涡（就是旋涡振荡）？如果不氮气吹干，可否用其它方法（空气吹干）？还有是否要复溶呢（那干的你怎么进样，下面你要液液萃取，岂能没液）？ 3.准备用液-液萃取：甲醇溶解上述上清液，（有机相：水相=2：1），高速离心，请上清于HPLC进样测量。请问，除了甲醇还有别的溶剂可选择吗？我准备预实验时试一下。高速离心速度多少才合适，离心时间呢（20000or150000 10min）？ 4.我看还有个浓集的步骤，请问是怎么操作呢？ 5.这些操作，比如2中取血浆，用移液枪合适吗（合适，200的），还是要用微量注射器，移液管之类的呢？ 问题有点多，请了解的大侠们指点指点。谢谢。 |
6楼2012-06-01 16:50:09
白水6177
木虫 (小有名气)
- 应助: 72 (初中生)
- 金币: 2356.8
- 散金: 100
- 红花: 8
- 帖子: 171
- 在线: 64.2小时
- 虫号: 598662
- 注册: 2008-09-10
- 性别: GG
- 专业: 药物代谢与药物动力学
7楼2012-06-02 09:29:51
8814402
至尊木虫 (职业作家)
- 应助: 18 (小学生)
- 贵宾: 0.381
- 金币: 12916.1
- 散金: 47
- 红花: 16
- 帖子: 4183
- 在线: 357.8小时
- 虫号: 1184404
- 注册: 2011-01-06
- 专业: 药物学其他科学问题
8楼2012-06-02 10:03:46
9楼2012-06-04 17:12:28