| 查看: 5285 | 回复: 8 | ||
[求助]
测小鼠中血药浓度的几个问题
|
|
本人学化学的，对药代动力学方面不是很了解，有几个问题想请教大家： 1.用HPLC测血药浓度，取1ml 全血后，加1%肝素钠立即摇匀，离心3500转/分，10分钟，分离血浆。这个转速和时间可以吗？肝素钠加多少？ 2.沉淀蛋白：取血浆0.5ml，加甲醇（血浆：甲醇=3：1），旋涡1min，4000转/分，10分钟，取上清液，于50℃水浴氮气吹干，1mL超纯水复溶，旋涡1 min。什么叫旋涡？如果不氮气吹干，可否用其它方法？还有是否要复溶呢？ 3.准备用液-液萃取：甲醇溶解上述上清液，（有机相：水相=2：1），高速离心，请上清于HPLC进样测量。请问，除了甲醇还有别的溶剂可选择吗？我准备预实验时试一下。高速离心速度多少才合适，离心时间呢？ 4.我看还有个浓集的步骤，请问是怎么操作呢？ 5.这些操作，比如2中取血浆，用移液枪合适吗，还是要用微量注射器，移液管之类的呢？ 问题有点多，请了解的大侠们指点指点。谢谢。 |
回复此楼» 猜你喜欢
308求调剂
已经有4人回复
-
NSFC申报书里申请人简历中代表性论著还需要在申报书最后的附件里面再上传一遍吗
已经有14人回复
-
材料与化工一志愿南昌大学327求调剂推荐
已经有6人回复
-
化学调剂0703
已经有7人回复
-
327求调剂
已经有11人回复
-
调剂
已经有8人回复
-
梁成伟老师课题组欢迎你的加入
已经有7人回复
-
伙伴们，祝我生日快乐吧
已经有24人回复
-
中科院材料273求调剂
已经有3人回复
-
材料工程专硕274一志愿211求调剂
已经有5人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 不同前处理的小鼠静注同样量的药物2min后为什么血药浓度不一样？
已经有13人回复
- 血中浓度太低，检测不出，跪求原因
已经有12人回复
- 测血药浓度，加入内标的体积多大为好？浓度如何选定？
已经有5人回复
- 小鼠血药浓度太低，液相分析出现未知峰，且峰面积很大，不知道该如何分析
已经有9人回复
- 药动学中血药浓度可疑值的取舍？
已经有21人回复
- 小鼠眼眶取血后离心血清的问题
已经有13人回复
- 建立体内药物分析方法，却不做药代，是否可行？？
已经有10人回复
- 剖取小鼠脑组织的问题，目的是测定脑组织内药物含量
已经有10人回复
- 【求助】请教HPLC测定血药跟尿液浓度时加入内标物的问题
已经有3人回复
2楼2012-05-11 13:00:05
rainbow_zyt
木虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 2226.4
- 散金: 10
- 红花: 2
- 帖子: 284
- 在线: 97.4小时
- 虫号: 1164464
- 注册: 2010-12-07
- 性别: GG
- 专业: 食品科学基础
【答案】应助回帖
★
感谢参与，应助指数 +1
豆哥: 金币+1, 谢谢参与交流 2012-05-14 08:58:50
感谢参与，应助指数 +1
豆哥: 金币+1, 谢谢参与交流 2012-05-14 08:58:50
|
问题一：转速和时间合适，肝素钠加入量的原则是：1ml的血液需要肝素0.1-0.2mg或者20IU（1mg相当于126IU），具体看你使用的肝素的活性配制一定浓度的水溶液就可以，这个量不要求太准确。 问题二：涡旋就是充分的混合，让蛋白质沉淀，让你的药物从蛋白质中释放出来。不用氮气吹干，可以用真空旋转蒸干，但是如果你的量很少的话，损失很严重，因此建议用氮气吹干，氮气又不贵。 问题三：液相流动相的选取是要参考你的目标检测物的，除了甲醇，还有乙腈等可以选择，乙腈的效果一般比甲醇好些，但是具体问题具体分析。 问题四：药物的浓缩富集有很多种方法，例如过柱子洗脱富集、蒸干溶剂富集等等，找到一种合适自己的，具体操作要看你选取什么样的富集方法。 问题五：移液枪当然操作起来比移液管之类的简单而且，对于微升级别体积的溶液你能用移液管吗？ 建议去图书馆找相关书籍看看 |
3楼2012-05-11 16:53:16
4楼2012-05-13 13:21:29
believe123
金虫 (初入文坛)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1068.9
- 红花: 1
- 帖子: 21
- 在线: 60.9小时
- 虫号: 1619707
- 注册: 2012-02-15
- 性别: MM
- 专业: 药剂学
5楼2012-06-01 16:31:47
【答案】应助回帖
|
1.用HPLC测血药浓度，现在管子中加10ul肝素，取0.3ml（太多老鼠要死了） 全血后，，离心8000转/分，5分钟，分离血浆。 2.沉淀蛋白：取血浆0.5ml，加甲醇（血浆：甲醇=3：1），旋涡1min，4000转/分，10分钟，取上清液，于50℃水浴氮气吹干，1mL超纯水复溶，旋涡1 min。什么叫旋涡（就是旋涡振荡）？如果不氮气吹干，可否用其它方法（空气吹干）？还有是否要复溶呢（那干的你怎么进样，下面你要液液萃取，岂能没液）？ 3.准备用液-液萃取：甲醇溶解上述上清液，（有机相：水相=2：1），高速离心，请上清于HPLC进样测量。请问，除了甲醇还有别的溶剂可选择吗？我准备预实验时试一下。高速离心速度多少才合适，离心时间呢（20000or150000 10min）？ 4.我看还有个浓集的步骤，请问是怎么操作呢？ 5.这些操作，比如2中取血浆，用移液枪合适吗（合适，200的），还是要用微量注射器，移液管之类的呢？ 问题有点多，请了解的大侠们指点指点。谢谢。 |
6楼2012-06-01 16:50:09
白水6177
木虫 (小有名气)
- 应助: 72 (初中生)
- 金币: 2356.8
- 散金: 100
- 红花: 8
- 帖子: 171
- 在线: 64.2小时
- 虫号: 598662
- 注册: 2008-09-10
- 性别: GG
- 专业: 药物代谢与药物动力学
7楼2012-06-02 09:29:51
8814402
至尊木虫 (职业作家)
- 应助: 18 (小学生)
- 贵宾: 0.381
- 金币: 12916.1
- 散金: 47
- 红花: 16
- 帖子: 4183
- 在线: 357.8小时
- 虫号: 1184404
- 注册: 2011-01-06
- 专业: 药物学其他科学问题
8楼2012-06-02 10:03:46
9楼2012-06-04 17:12:28
