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zuo-aihua

铜虫 (小有名气)

[求助] 剖取小鼠脑组织的问题,目的是测定脑组织内药物含量

为了测定进入血脑屏障的药物含量,需要剖取小鼠的脑组织,文献中一般的方法就是断头取血,立即剖取脑组织, 生理盐水冲洗,吸干称重。
问题是感觉剖取的脑组织,即使用生理盐水冲洗,也只是表面的,看起来还是发红的样子,尤其是小鼠的,体积比较小,在测定药物含量的时候,血药浓度会不会产生很大的影响呢?
想请教下做过的同学,怎么操作才能尽量让血少些呢?测定脑中药物含量是不是直接就忽视了血的干扰,还是规范操作后血的干扰已经忽略不计了?
还望大家给些建议,在此先谢了!

[ Last edited by zuo-aihua on 2011-6-20 at 22:01 ]
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070166017

木虫 (正式写手)

引用回帖:
1690278楼: Originally posted by wangyuanji at 2011-06-28 11:05:14
我也在做这方面的试验,我也是先摘眼球取血,再处死剥取脑组织。也是要考察药物是否能穿过血脑屏障,那么就存在一个问题,我们老师说,剥取的脑组织应该仔细去除外面的一层薄膜,就是那层布满毛细血管的膜,否则你测 ...

楼主也是做血脑屏障研究的。高兴认识你!不知道能不能交流一下学术。
留住的是幸福,丢失的是遗憾!
6楼2013-02-23 15:08:23
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普通回帖

jessica-wang

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


karl2100(金币+1): 谢谢参与讨论! 2011-06-23 20:03:06
zuo-aihua(金币+10): 谢谢! 2011-06-29 21:21:59
如果想让脑组织的血少,那就先把血给放了。
我们是也要检测血里的药物浓度,所以一般先摘眼球取血,断颈处死,再剥离组织。
另外,并不是忽视血对组织中药物浓度的影响。血液的影响,通常是用空白对照组动物的组织匀浆为参比调零的。
2楼2011-06-23 14:12:34
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dxp20082008

新虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


karl2100(金币+1): 谢谢回复! 2011-06-23 20:03:40
动作要快 即使血没有取完  
断后以后会有血 在血凝之前 脑组织一般不会成红色的
3楼2011-06-23 14:36:05
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song15wei

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


karl2100(金币+1): 多谢提供! 2011-06-23 20:03:22
引用回帖:
Originally posted by zuo-aihua at 2011-06-20 21:59:08:
为了测定进入血脑屏障的药物含量,需要剖取小鼠的脑组织,文献中一般的方法就是断头取血,立即剖取脑组织, 生理盐水冲洗,吸干称重。
问题是感觉剖取的脑组织,即使用生理盐水冲洗,也只是表面的,看起来还是发 ...

我之前做过,用灌注针插入左心室至主动脉弓,灌注生理盐水。剪破右心耳让血液流出来。冲完之后脑组织中的血液将全部被冲出来,脑组织白色,没有一点血色。呵呵,我做过好多遍了这个。。效果挺不错了,楼主可以试一试。
老老实实做事,踏踏实实做人!
4楼2011-06-23 15:21:11
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wangyuanji

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我也在做这方面的试验,我也是先摘眼球取血,再处死剥取脑组织。也是要考察药物是否能穿过血脑屏障,那么就存在一个问题,我们老师说,剥取的脑组织应该仔细去除外面的一层薄膜,就是那层布满毛细血管的膜,否则你测得的药物含量可能不仅仅是脑组织本身的药物含量,还有这层膜上血管中的药物含量,脑组织外面包裹的这层膜就是传说中的血脑屏障。
这层膜不容易剥除,因为它非常薄,我一般就是拿着弯镊仔细去除肉眼可见的血管就行了。
心态比能力重要
5楼2011-06-28 11:05:14
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wangyuanji

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2479886楼: Originally posted by 070166017 at 2013-02-23 15:08:23
楼主也是做血脑屏障研究的。高兴认识你!不知道能不能交流一下学术。...

很高兴与您交流!互相学习!
心态比能力重要
7楼2013-02-23 16:24:15
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小丫回家

新虫 (初入文坛)

请问一下,我也是在做这方面的实验,我的药物是脂溶性的小分子化合物,取脑组织测定其中的药物浓度,但是测不出来,请问脑组织匀浆的时候用生理盐水,我的药物是不是没有溶到生理盐水里面去?有没有这种可能?因为我做的药物本身是不太溶于水的,谢谢大家了
8楼2014-03-10 09:23:53
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铭记雪飞飘

新虫 (小有名气)

楼上,您的问题解决了吗?我现在也是脑组织处理后含量特低,回收率也低,求助
9楼2015-11-12 08:15:09
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viki_MDK

银虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by wangyuanji at 2011-06-28 11:05:14
我也在做这方面的试验,我也是先摘眼球取血,再处死剥取脑组织。也是要考察药物是否能穿过血脑屏障,那么就存在一个问题,我们老师说,剥取的脑组织应该仔细去除外面的一层薄膜,就是那层布满毛细血管的膜,否则你测 ...

请问是否有大鼠测试化合物血脑屏障的步骤?能否给我一份?万分感谢!!
10楼2016-06-07 14:10:20
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