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applexixixi

木虫 (小有名气)

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[求助] 亲们，有谁用过这几个酶切位点AlwI、AvaI、BsoBI、BseRI、BsiEI

最近在构建一个质粒，想切除一段序列，查了一下比较符合的酶切位点，有这么几个，AlwI、AvaI、BsoBI、BseRI、BsiEI，貌似都不是很常见，不知道虫友们是否用过，想知道酶切效果好不好。。。

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1楼2012-07-04 11:21:56

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karlgu18

新虫 (小有名气)

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★ ★
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流 2012-12-19 17:34:15

酶切问题也是一个有学问的问题
(1)查找供应这几种酶的供应商，比如invitrogen的目录，对自己出售的酶都有详细的介绍，包括加入量，反应体系温度，酶切效率等。
(2) 这几种酶没有见过，也没有用过
(3) 一般而言，酶切时间不超过4h，一般2-3h足够,ligase喜欢过夜，越晚酶活力降低，并且自身也会降解。酶量不超过体积的1/10.