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zwx26_2006

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[交流] 【求助/交流】部分酶切怎么做已有3人参与

加了酶切位点后，都测完序了，才发现，目的基因本身就带着同样的酶切位点，只能通过部分酶切来弥补了，但是不知道怎么做，部分酶切的体系或者操作是怎样的呢？请各位朋友指点！

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1楼2010-06-02 17:46:27

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ben1147

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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+2):感谢交流~~ 2010-06-02 18:36:18

体系和正常酶切没什么区别

酶少加一点（根据加入酶切体系的DNA量决定内切酶用量，1~2U Enz/ug DNA），缩短酶切时间

如果样品足够多的话，最好是先摸索一下，做几管平行样，酶切开始后每20min取出一管终止酶切，最后一起跑电泳，选择部分酶切条带比较满意的作为正式酶切的条件

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2楼2010-06-02 17:53:00

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zwx26_2006

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引用回帖:

Originally posted by ben1147 at 2010-06-02 17:53:00:
体系和正常酶切没什么区别

酶少加一点（根据加入酶切体系的DNA量决定内切酶用量，1~2U Enz/ug DNA），缩短酶切时间

如果样品足够多的话，最好是先摸索一下，做几管平行样，酶切开始后每20min取出一管终止酶 ...

好！谢谢你