| 查看: 4516 | 回复: 6 | |||
[求助]
关于IPTG诱导请教各位。 已有4人参与
|
|
现在我们需要在发酵罐上进行IPTG诱导，有几个问题请教各位： 1.关于IPTG浓度问题，如浓度低于某一值，是不会产生诱导效应还是绝大部分的菌体没有被诱导？从原理上分析，似乎是绝大部分菌体未被诱导吧？那这样的话，IPTG的量就和诱导时的菌浓有关了。 2.大量的IPTG，如10L某一浓度的溶液，是如何添加入发酵罐呢？缓慢流加还是一次性快速加入？快速加入毒性较高，缓慢加入速度以什么为标准呢？ 3.诱导时的糖饥饿问题。加入IPTG前后需要葡萄糖饥饿，那么一般是添加IPTG多少时间后加入葡萄糖呢？ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 生工检测理论与实务 |
» 猜你喜欢
今日不放榜？网传国自然预计 8 月 27 日可查结果
已经有20人回复
-
2026国自然函评费到账
已经有6人回复
-
科研孤儿太难了
已经有18人回复
-
建议基金发布提前给出明确的时间点
已经有12人回复
-
看来今天不会放榜了？
已经有11人回复
-
时间戳又变了
已经有19人回复
-
filecode，4个jtjc了
已经有14人回复
-
让我中一个面上吧！
已经有13人回复
-
人气不行了
已经有7人回复
-
感觉是下周放榜了
已经有12人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 片段采取无缝克隆重组后，测序结果正确，但用IPTG诱导后，都未见目的蛋白表达
已经有9人回复
- 关于IPTG在人用药物蛋白大肠杆菌发酵表达中的应用问题
已经有2人回复
- iptg诱导大肠表达，iptg加入的时间是什么时候？
已经有16人回复
- 请问IPTG是通过什么途径进入细胞内，而发生诱导的呢
已经有11人回复
- IPTG诱导表达蛋白
已经有14人回复
- IPTG诱导表达的问题
已经有12人回复
- Ecoli 在IPTG诱导前后生活状态有什么差异？
已经有7人回复
- 请问pET30b这个载体在IPTG诱导后有没有可能表达除了目的蛋白以外的其他蛋白？
已经有16人回复
- 无IPTG诱导蛋白依然很好表达
已经有13人回复
- 【资料】studier的自动诱导系统---原核诱导表达蛋白，无需IPTG
已经有125人回复
- T7载体的IPTG诱导
已经有10人回复
- IPTG诱导后，考染后什么蛋白条带都没有
已经有12人回复
- IPTG诱导表达出现两条带，并离的很近，什么原因啊？
已经有6人回复
- 【求助/交流】大家有用到过什么过表达的载体吗？需要诱导剂诱导吗？
已经有15人回复
- 【求助/交流】请问IPTG的保存时间
已经有7人回复
- 【求助/交流】十万火急，IPTG诱导是怎么回事，给我说个大概
已经有9人回复
- 【求助/交流】IPTG
已经有18人回复
- 【求助/交流】蛋白诱导表达不出目标条带
已经有41人回复
- 【求助/交流】IPTG诱导时间
已经有8人回复
- IPTG诱导时间？
已经有3人回复
- 【求助/交流】IPTG诱导剂的用量
已经有5人回复
- 【求助/交流】关于IPTG的配制
已经有10人回复
- 【求助/交流】IPTG含量
已经有15人回复
张香玲1017
铁杆木虫 (著名写手)
冷夜雨
- 应助: 148 (高中生)
- 金币: 7571.8
- 散金: 315
- 红花: 11
- 帖子: 1394
- 在线: 554小时
- 虫号: 962983
- 注册: 2010-03-06
- 性别: MM
- 专业: 微生物生理与生物化学
2楼2014-08-25 17:29:55
3楼2014-08-25 20:40:09
|
可能我没说清楚。 我想知道，当IPTG低于某一浓度，是否没有诱导效应？比如说有100个菌体，如果每个菌体需要2个IPTG进行诱导，那我加入100的IPTG，是只有50个菌体被诱导了还是全部都没有诱导？ 如果只要有IPTG就有诱导效应而不是有最低浓度的话，我的发酵工艺就可以参照诱导过程的溶氧变化来指导IPTG的添加。由于IPTG的毒性，当加入后，溶氧会上升，那么理论上讲，如果在加入后一段时间，比如半个小时，开始合成目的蛋白，溶氧开始下降，此时我继续缓慢的加入IPTG，控制溶氧处于一相对固定水平，使毒性和产目的蛋白处于一个平衡，则可继续诱导尚未表达目的蛋白的菌体，当溶氧出现上升时，则说明IPTG已经达到了最适浓度。 当然，上述是纸上谈兵，由于是第一次做，比较慎重，请各位达人不吝解答。 |
4楼2014-08-26 08:19:39
5楼2014-08-26 23:52:20
hunter1984
金虫 (小有名气)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 839.9
- 帖子: 125
- 在线: 24.9小时
- 虫号: 403532
- 注册: 2007-06-15
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
6楼2014-09-03 09:05:58
7楼2021-02-04 10:51:40
40