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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请问IPTG是通过什么途径进入细胞内，而发生诱导的呢
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bolysu

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1楼 2013-09-18 15:18:15
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hym0411

木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
bolysu(金币+1): 谢谢参与
amisking: 金币+3, 鼓励帮助虫子！奖励一下！ 2013-09-18 22:32:14
amisking: 回帖置顶 2013-09-18 22:32:16
你可以查下有关乳糖操纵子相关的文献。IPTG是异丙基巯基半乳糖苷，是一种乳糖类似物，它不是半乳糖苷酶的底物，是一种安慰性诱导物。其实在没有乳糖诱导时lac操纵子就有一个本底水平表达，就是在非诱导状态下有少量的lac mRNA合成，这种合成被称为本底水平的永久型合成。由于阻遏物的结合并不是绝对紧密的，即使在它与操纵基因紧密结合时，也会偶尔掉下来，这时启动子的障碍被解除，RNA聚合酶开始转录。正是这种本底水平表达，每个细胞内可有几个分子的β-半乳糖苷酶和乳糖透过酶。当加入乳糖，再单分子透过酶的作用下，少量异构乳糖进入细胞，又在单个β-半乳糖苷酶分子作用下转变成异构乳糖。摸个异构乳糖与结合在操纵区上的阻遏物相结合并使后者失活而离开操纵区，开始了lac mRNA的生物合成。这些mRNA分子编码了大量的β-半乳糖苷酶和乳糖透过酶，其结果导致乳糖大量涌入细胞。
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4楼2013-09-18 21:47:50
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hym0411

木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★
gyesang: 金币+5, 鼓励回帖交流！ 2013-09-19 13:46:11
gyesang: 回帖置顶 2013-09-19 13:46:14
引用回帖:
8楼: Originally posted by bolysu at 2013-09-19 09:01:23
谢谢您的回复，其实我想问的是IPTG和乳糖有什么差别，乳糖的诱导受到葡萄糖的抑制是由于乳糖的转运蛋白受到葡糖糖磷酸转移酶途径的抑制，那IPTG既然不会受到葡萄糖的抑制，那么它的运输途径就不会受到葡萄糖的抑制 ...

您好，葡萄糖的这种抑制作用是代谢物阻遏效应。其实，激活乳糖操纵子还要有一个重要复合物，就是cAMP-CRP。cAMP是ATP在腺苷酸环化酶作用下转变而来的，cAMP的浓度受到葡糖糖代谢的调节，这个有人说在糖酵解途径中从6-磷酸葡萄糖到甘油之间的某些中间代谢产物能够抑制腺苷酸环化酶的活性，导致cAMP浓度降低。形成的复合物cAMP-CRP就少，而lac的激活需要cAMP-CRP结合在DNA的启动子区域上，转录次能够进行。所以lac类操纵子也被称为降解物敏感性操纵子。IPTG在lac的激活过程中起到的是诱导作用，不能被半乳糖苷酶降解，而IPTG与阻遏物结合后是阻遏物失活而离开基因的操纵区，使lac mRNA 的转录成为可能。对于“那IPTG既然不会受到葡萄糖的抑制，那么它的运输途径就不会受到葡萄糖的抑制”，我想是cAMP-CRP结合DNA的位置和基因下游的lac操纵区的阻遏物之间的关系导致的，我就这么说吧，如果cAMP-CRP复合物没有结合在启动子区，该启动子后面的mRNA转录将会很困难，转录成功的概率将会很低，如果启动子区域有该复合物的结合，改变了DNA的构想，使转录能够顺利进行，但是如果lac的操纵区仍有阻遏物存在，即IPTG没有与阻遏物结合，lac将仍不会顺利转录，只有本底水平的表达。同样的，即使IPTG与阻遏物结合了，但是启动子区域没有cAMP-CRP结合，DNA没有形成以利于转录的正确构象，那么lac mRNA 的转录仍将以极低的转录水平转录。
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9楼2013-09-19 13:21:56
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bolysu

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10楼2013-09-19 17:59:08
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547star

木虫 (著名写手)
★ ★ ★
bolysu(金币+1): 谢谢参与
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-09-19 13:46:29
引用回帖:
4楼: Originally posted by hym0411 at 2013-09-18 21:47:50
你可以查下有关乳糖操纵子相关的文献。IPTG是异丙基巯基半乳糖苷，是一种乳糖类似物，它不是半乳糖苷酶的底物，是一种安慰性诱导物。其实在没有乳糖诱导时lac操纵子就有一个本底水平表达，就是在非诱导状态下有少量 ...

乳糖进入细胞是你的这个答案，但我看过的资料是说，IPTG在乳糖透过酶被敲除的情况下，也可以诱导，跟乳糖进入细胞是不一样的。
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6楼2013-09-18 23:22:59
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bolysu

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8楼2013-09-19 09:01:23
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hym0411

木虫 (正式写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by bolysu at 2013-09-19 17:59:08
你这种理论是教材里的经典理论，但经过后面很多的验证代谢物阻遏效应的真正原因不是什么CRP，它只是有一定的作用，主要原因是非PTS系统糖转运蛋白受到葡萄糖PTS系统的抑制。具体可以看鄙人的一篇文章，我已经将文献 ...

不好意思，研一小硕一枚，在此班门弄斧了。
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11楼2013-09-20 06:59:55
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readytogo2楼
2013-09-18 15:51  
bolysu(金币+1): 谢谢参与
userhung3楼
2013-09-18 15:58  
bolysu(金币+1): 谢谢参与
yingying15885楼
2013-09-18 23:01  
bolysu(金币+1): 谢谢参与
小乖_19907楼
2013-09-19 07:49  
bolysu(金币+1): 谢谢参与
梦想天行12楼
2016-11-05 16:08  
bolysu(金币+1): 谢谢参与
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