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扩增不出产物 已有5人参与
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本人刚合成的引物正在做梯度PCR，目的条带为1650bp,公司合成的单子显示的上游引物为58.3，下游为58.9。用普通的aq酶没有扩增出来， 引物二聚体也没有，所用的枪头，管子都是刚灭菌的，cDNA没有问题，在超净工作台上操作。体系是20ul ，具体如下， Taq酶 0.3ul， 10*Buffer 2 ul， dNTP 1ul， cDNA 0.5ul， Mgcl2 1.2ul (25mM) 上游引物0.5 下游引物0.5 ddH2O 14ul 95 5min 95 30s 54/64 50s 72 100s 28个循环 72 10min 请各位帮忙分析下，是什么原因呢 |
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4楼2014-08-26 10:56:05
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