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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 16s r DNA 扩增产物为1000bp，左右，是否扩增成功了？
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bear0329

金虫 (正式写手)

[求助] 16s r DNA 扩增产物为1000bp，左右，是否扩增成功了？

我从土壤中提取微生物DNA，进行16s r DNA  扩增，见图，左边第二泳道为DL2000marker，第三泳道为（500-20000） marker，各位高手帮忙分析下，是否已经扩增出来了。谢谢啊，刚接触PCR，都不懂。还望指教
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以马内利！
1楼 2011-05-23 18:02:23
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sunlblove

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2): 鼓励应助 2011-05-23 20:20:57
bear0329(金币+1): 谢谢你 2011-05-23 23:05:34
怎么跑这么长时间啊 最下面的都跑出去了  
一般细菌16s都是1.5KB左右，你是用的通用引物么？
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2楼2011-05-23 19:35:38
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rainwander

铁杆木虫 (知名作家)

优秀版主
没说明用的哪对引物
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千万不要因为走的太久，而忘记了我们为什么出发~~~~~~ForDream~~~~~~
3楼2011-05-23 19:46:49
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bear0329

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by sunlblove at 2011-05-23 19:35:38:
怎么跑这么长时间啊 最下面的都跑出去了  
一般细菌16s都是1.5KB左右，你是用的通用引物么？

用的引物是27f/907r。
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以马内利！
4楼2011-05-23 20:34:51
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bear0329

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by rainwander at 2011-05-23 19:46:49:
没说明用的哪对引物

我用的是907R和27F这对引物
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以马内利！
5楼2011-05-23 20:35:29
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rainwander

铁杆木虫 (知名作家)

优秀版主

【答案】应助回帖

引用回帖:
Originally posted by bear0329 at 2011-05-23 20:34:51:
用的引物是27f/907r。

那就差不多对了，

送去测序看看，

还以为你用的是27F+11492R呢
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千万不要因为走的太久，而忘记了我们为什么出发~~~~~~ForDream~~~~~~
6楼2011-05-23 20:37:45
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bear0329

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by rainwander at 2011-05-23 20:37:45:
那就差不多对了，

送去测序看看，

还以为你用的是27F+11492R呢

我是想做T-RFLP的，27f加了荧光标记，看了文献说细菌16SrDNA一般都1.5KB，我不敢确定，我也是刚接触分子，好多都不懂。谢谢你啊~
如果可以的话，就多P几管出来，然后回收纯化，再酶切送检了。
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以马内利！
7楼2011-05-23 20:42:57
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rainwander

铁杆木虫 (知名作家)

优秀版主
引用回帖:
Originally posted by bear0329 at 2011-05-23 20:42:57:
我是想做T-RFLP的，27f加了荧光标记，看了文献说细菌16SrDNA一般都1.5KB，我不敢确定，我也是刚接触分子，好多都不懂。谢谢你啊~
如果可以的话，就多P几管出来，然后回收纯化，再酶切送检了。

，客气啦

27F+1492R这对引物P出来，差不多是1.5K
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千万不要因为走的太久，而忘记了我们为什么出发~~~~~~ForDream~~~~~~
8楼2011-05-23 21:17:29
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sunlblove

银虫 (小有名气)
对 楼上说的对
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9楼2011-05-24 11:16:38
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